文档介绍:中国医科大学
硕士学位论文
缺氧对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响
姓名:赵久红
申请学位级别:硕士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:王振宇
20090401
缺氧对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响材料和方法目的·中文论著摘要·⒃嘌⒌タ寺∨嘌⒋ù嘌⑸窬上赴探讨单纯性缺氧对新生大鼠海马组织神经干细胞增殖和分化的影响。将只新生大鼠随机分为正常对照组缺氧组缺氧组孔弧新生霿笫竽院B碜橹赴诤屑钚猿上宋ひ蜃表皮生长因子虰的无血清培养液中进行原代培养。当原代培养克隆球直径约为痶保糜邢尴∈头ń械ハ赴寺∨嘌单细胞克隆培养形成的克隆球直径约痩时进行传代培养。驳鞍脱趟峒嚎杉免疫荧光染色当第赴蠖嗍寺∏蛑本对嘉/时,部分克隆球进行巢蛋白和烟酸己可碱庖哂ü馊旧ā盏挤只叭旧当第赴蠖嗍寺∏蛑本对嘉/时,部分克隆球在含%胎牛血清的/嘌杏盏挤只S盏挤只南赴直鹦猩窬L匾煨烯醇化酶⒔褐氏宋嵝缘鞍脱趟峒嚎杉免疫荧光染色。
实验结果结论关键词⑼臣品治⑸窬上赴募ń峁⑷毖醵陨窬上赴鲋秤跋斓慕峁⑷毖醵陨窬上赴只跋斓慕峁缺氧;新生大鼠;海马;神经干细胞;增殖;分化记录各组神经干细胞克隆球生长至直径达到痾彼枋奔洌患剖个有核细胞中粜缘纳窬5母鍪扑忝孔樯窬上赴蛏窬7只谋率,进行统计学分析。单细胞克隆培养形成的克隆球表达,诱导分化后细胞表达组、椤橄赴嘌寺∏蛑本洞镂组、椤樯窬上赴只I窬5谋壤直鹞.%、..、.ァ8髯橹渚嬖谙灾钜欤琾.。短时间缺氧可促进在体神经干细胞增殖及神经干细胞向神经元分化;长时间缺氧则抑制在体神经干细胞增殖及神经干细胞向神经元分化。枋奔浞直鹞#。、、。
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论文作者签名:毒洽冬耻日期:盈型扛越指导教师签名:善—豇单一论文作者签名:赵丕丝中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C内容除外圆捎糜坝⑺跤』蚱渌侄伪4媛畚摹期:表示谢意。盈口§.主:丝日
缺氧对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响·论文·刖新生儿缺血缺氧能造成瘫痪、癫痫、学忆功能改变、运动功能异常等,上述表现与神经元的异常改变有关。神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞来源于同一种细胞:神经干细胞。【康晔紫忍岢隽松窬上赴琋的概念,并通过实验首次证实神经干细胞的存在。神经干细胞是具有自我更新和多向分化潜能的细胞,存在于哺乳动物中枢神经系统的多个部位,包括皮质、海马结构、纹状体、室下区/室管膜等】。神经干细胞不仅能促进神经元的再生及脑组织的修复,而且通过基因操作,可以作为载体用于神经系统疾病的基因治疗,如:表达外源性的神经递质、神经营养因子及代谢性酶。神经干细胞具有易于在体外大量增殖、移植到神经系统后仍可增殖、免疫原性小、能够定向迁移、,被广泛用于神经系统变性疾病例如帕金森病、阿尔茨海默病等的治疗研究緇。然而,这些疾病的治疗需要的是合成特定神经递质的神经元,因此,如何得到大量的神经干细胞、如何控制神经干细胞定向分化为神经元极为重要。神经干细胞的分化是神经干细胞的基本属性之一,也是神经干细胞基础研究的重要方面,是神经科学领域未来的研究重点之一,神经干细胞的分化在很大程度上取决于微环境,包括微环境中各种神经营养因子、神经递质、激素、细胞外基质、细胞间相互作用等。有报道缺氧能促进体外培养神经干细胞的存活和增殖,但其存在时间相关性,表现为初期神经干细胞增加,而后神经干细胞减少【6杂谌毖醵栽谔宕笫竽内神经干细胞有何影响目前尚未见有关的研究报道。大鼠是用于研究大脑损伤的最普遍动物之一,它的脑足够大,手术或取材比小鼠容易,而体积又相对较小容易照顾和处理。为模拟新生儿缺氧性脑损伤,本置
材料和方法一、材料实验动物主要试剂实验选用新生齑笫笞魑J笛槎韵蟆本实验拟通过单纯缺氧,研究缺氧条件下新生大鼠海