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微生物遗传酵母菌遗传.ppt

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微生物遗传酵母菌遗传.ppt

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微生物遗传酵母菌遗传.ppt

文档介绍

文档介绍:微生物遗传酵母菌遗传
现在学****的是第1页,共25页
概论
酵母属于真核生物,是单细胞真菌,生长较快,目前已知有1000多种酵母。
可将酵母分成三类:形成孢子的株系属于子囊菌和担子菌。不形成孢子但主要通过芽殖来繁殖的称为c sequences, CEN):酵母约200bp,较短(点着丝粒);区域着丝粒:40Kb-几个Mb 。
现在学****的是第11页,共25页
端粒
端粒(Telomere)位于真核生物线形染色体两端,由DNA重复序列和蛋白质构成的复合体,作用是保持染色体的完整性。
端粒通常是由富含鸟嘌呤核苷酸(G)的短的串联重复序列组成。
端粒的重复序列不是在染色体DNA复制时连续合成的,而是由端粒酶(telomerase)合成后添加到染色体的末端。
酿酒酵母的端粒序列约为300bp.
现在学****的是第12页,共25页
复制起点
酵母的复制起点是指酵母染色体上控制DNA复制起时的一小段DNA序列,通常称为自主复制序列(ARS)
酿酒酵母中约有400个ARS,平均20-50kb一个,长度为100-200bp,富含AT。
现在学****的是第13页,共25页
线粒体基因组及其遗传
每个酵母细胞约含10-50个线粒体
线粒体DNA(mtDNA)编码线粒体自身所需的rRNA(2,21s和15s), tRNA(16)以及某些蛋白质,如细胞色素和ATP酶,
周长26μm的环状DNA分子,84kb。
特点
绝大多数无重复序列
半自主性
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酵母质粒的生物学特性
2μm质粒
大多数酵母菌株含有一种称之为2μm的质粒
①封闭环状的双链DNA分子,周长约2μ(6kb左右),以高拷贝数存在于酵母细胞中,每个单倍体基因组含60-100个拷贝;
②各含约600bp长的一对反向重复序列;
③由于反向重复序列之间的相互重组,使2μ质粒在细胞内以两种异构体(A和B)形式存在;
④该质粒只携带与复制和重组有关的4个蛋白质基因(REP1、REP2、REP3和FLP),不赋予宿主任何遗传表型,属隐蔽性质粒。
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嗜杀现象
由双链线状RNA决定
嗜杀质粒:蛋白外壳包裹,又称类病毒颗粒,分为L-型和M-型
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酵母基因表达的调控
第一类:瞬时调控(可逆性调控)
对环境变化的反应
第二类:发育调控(不可逆调控)
决定生长、分化、发育
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转录调控
顺式作用元件
上游激活序列(UAS):100—1500bp
TATA元件:40—120bp
转录起始位点
反式作用因子
TATA结合蛋白(通用转录因子)
远程调控因子(蛋白间的相互作用:接头)
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反式转录激活因子
转录激活因子在结构上是组件式的, 即这些因子往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成,其中有
DNA结合结构域(DNA binding domain,DB)
转录激活结构域(activation domain,AD)
DB识别DNA上的特异序列,并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游,AD可同转录复合体的其他成分作用,启动它所调节的基因的转录。
二个结构域不但可在其连接区适当部位打开,仍具有各自的功能,而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。
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酵母双杂交
酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法。
现在学****的是第20页,共25页
酿酒酵母细胞分裂的遗传控制
细胞分裂分为有丝分裂和减数分裂
减数分裂过程包括接合型遗传控制、细胞接合和减数分裂。
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A和α单倍体细胞
Asg基因和αsg基因(sg, specific gene)
hsg基因:只在单倍体内表达的基因
MATα编码α1(激活αsg基因)和α2(抑制Asg基因)
MATa编码a1(只在单倍体表达)和a2(与结合无关)
MATα/ MATa(二倍体): α2和a1协同抑制α1和hsg基因的表达, α2抑制Asg基因的表达,使细胞无结合能力。
现在学****的是第22页,共25页
整合质粒(yeast integration plasmid,YIp)
含有酵母的筛选标记(URA3、HIS3、LEU2基因)。但缺乏酵母的复制起始位点,所以,它只有整合到酵母染色体中才能稳定。
现在学****的是第23页,共25页
自我复制型酵母载体-YEp系列
YEp系列含有2μ质粒的复制起始部位和rep基因片段,和选择基因LEU