文档介绍:微生物实验-细菌培养、接种
内 容
(录象)
(讲解示教)
3. 细菌接种法(一份/组)讲解
、物品中细菌检查(一份/组)讲解
、空气中细菌检查(一份/桌)讲解
-细菌培养、接种
内 容
(录象)
(讲解示教)
3. 细菌接种法(一份/组)讲解
、物品中细菌检查(一份/组)讲解
、空气中细菌检查(一份/桌)讲解
(讲解)
7. 第一次实验报告评讲
基础培养基的制备
去筋膜黄牛肉绞碎500g加入1000ml蒸馏水
直接煮沸2小时
调整酸碱度至pH
过滤,补足失水
重新校正pH一次
分装,高压灭菌,
15磅(℃)15~20分钟
检菌如无细菌生长
(液体透明)即可应用
脱脂纱布过滤,按比例加入1%蛋白胨、%
NaCl,%K2HPO4加热溶解补足水至1000ml
4℃浸泡过夜煮沸半小时
人体、物品中细菌检查
手
衣
发
钱
材料:普通平板 (1份/组)
盖上,标记 , 置 37℃,18-24h后观察。
飞沫、空气中细菌检查
材料:血平板 (1份/组)
距口15—20cm
用力咳嗽三次
置空气中
(避日光照射)
30分钟
飞 沫
空 气
盖上,标记 , 置 37℃,18-24h后观察。
结果观察——血平板
表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。
甲型溶血性链球菌形成的α溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象,属于不完全溶血。
金黄色葡萄球菌形成的β溶血现象也称为乙型溶血现象,属于完全溶血。
细菌培养接种法——平板划线法
菌种:混合菌液
材料:普通平板
用具:接种环
方法:分区划线
1区
2区
3区
4区
原始区域
半固体培养基
斜面培养基
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种:大肠杆菌或葡萄球菌斜面
材料:斜面、液体、半固体培养基
用具:接种环、接种针
液体培养基
结果观察——普通平板
普通琼脂平板培养基上,大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。
注意:大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
***红(methyl red)实验
M - ***红(methyl red)实验
葡萄糖→***酸→乙酰***甲醇 ***红 -
葡萄糖→***酸 ***红 +
吲哚(indol)试验
I-吲哚(indol)试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚
↑
对二***氨基苯甲醛
枸橼酸盐利用试验
C -枸橼酸盐利用(citrate utilization)试验
利用枸橼酸盐生长 +
不能利用 -
硫化氢试验
硫化氢试验(醋酸铅培养基)
某些细菌分解含硫氨基酸,生成H2S,H2S遇铁盐(如硫化亚铁、醋酸铅等),则形成黑褐色硫化铁(铅)沉淀物,而呈黑色为(+)。
尿素酶试验
产生氨使培养基变碱,指示剂显红色,为阳性。如:变形杆菌为阳性。
IMViC试验
I - 吲哚(indol)试验
M - ***红(methyl red)试验
V - VP(Voges-Proskauer)试验
C -枸橼酸盐利用(citrate utilization)试验
IMViC试验
I M Vi C试验
大肠埃希菌 + + - -
产气杆菌 - - + +
IMViC试验:
是吲哚、***红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定。
实验小结
1、三类培养基
液体培养基——用于增菌;
均匀混浊、沉淀、表面生长
半固体培养基——观察动力;保存菌种(6个
月);穿刺线,扩散生长
固体培养基——分离纯化;保存菌种(1个月)
菌落、菌苔
2、IMViC试验
第三次实验课内容
1、热力对细菌和芽胞的杀菌作用
2、紫外线的杀菌作用
3、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验
4、耐药性变异;
5、细菌的鞭毛变异;
6、高压灭菌器的使用;
7、细菌的鉴定程序