文档介绍：篇一：高效液相色谱实验报告高效液相色谱实验报告一、实验目的
1了解液相色谱的发展历史及最新进展2学****液相色谱的基本构造及原理
3掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过hplc分离测定来对目标化合物的分析鉴定。二、实验原理液相色谱法采的理论，在技术上采用高压输液泵，高效固定相和高灵敏的检测器，而发展起来的快速分离分析技术。具有分离效能高，检出限低，操作自动化和应用范围广的特点。
其基本原理：利用欲分配的诸组分在固定相和流动相间的分配有差异（即由不同的分配系数），当两相做相对运动时，这些组分在此两相中分配反复进行，从几千次到百万次，即使组分的分配系数只有微小差异，随着液体流动相却可以有明显的差异，最后使这些组分都得到分离，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。三、[仪器和试剂:]
主要仪器：岛津液相色谱仪（lc-10at）[配有紫外检测phenomenexo柱];10卩l微量注射
器2、试剂：甲醇、水
苯和甲苯混合待测溶液苯标准溶液：
甲苯标准溶液：、甲苯混合标准溶液：、、、、[实验步骤]
1、按操作规程开机。
2、.选择合适的流动相配比，优化色谱条件通过调节溶剂甲醇和水的混合比例，从而来优化色谱调剂。
调好最佳色谱条件，控制流速为1ml/min。柱温30C，检测波长354nm3、苯、甲苯定性分
析
在最佳条件下，待基线走稳后，用10卩l微量注射器分别进样10卩l苯和甲苯混合待测溶液，10卩l苯标准溶液（）和10卩l甲苯标准溶液（）（微量注射器用甲
醇润洗3〜5遍），观察并记录色谱图上显示的保留时间，确定苯和甲苯的峰。4、苯、甲苯
定量分析
在最佳条件下，待基线走稳后，、、
卩l/。观察并记录各色谱图上的保留时间和峰
面积。绘制苯和甲苯混合标准溶液峰面积与相应浓度的标准曲线5、苯和甲苯混合待测溶液
分析
根据得到的苯和甲苯混合待测溶液的液相色谱图上显示的峰面积值，从绘制的标准曲线上查出苯和甲苯混合待测溶液中苯和甲苯的各自的浓度。六、实验数据处理及分析1、色谱条件
优化

70%

min
分析：本次实验分别选择了甲醇：水=60%：40%，70%：30%，80%：20%的溶剂配比，通过比
较不同溶剂配比条件下，甲苯和苯的峰宽、保留时间从而确定采用甲醇：水=80%：20%作为本次实验的最佳色谱条件。2、定性分析
-
min
分析：在同一色谱操作条件和进样量下，分别测定试样溶液中苯和甲苯组分及已知苯和甲苯纯物质的保留时间，并将其色谱峰、保留时间与对应的已知苯和甲苯纯物质进行比较，两者基本相同，从而确定混合样品中含有苯和甲苯。3、定量分析
苯、甲苯混合标准溶液浓度分别为：1ul/ml,2ul/ml,5ul/ml,10ul/ml。
4、未知样品浓度
七、结果讨论
1、实验