文档介绍：Sf9培养要点：之邯郸勺丸创作
创作时间：二零二一年六月三十日
温度：27-28摄氏度
pH: , ,随培养时间的延长，Ph值会增加
传代时间：72h （三天左右）
细胞来源：Sf9 （货号B825-01 ）Sf9培养要点：之邯郸勺丸创作
创作时间：二零二一年六月三十日
温度：27-28摄氏度
pH: , ,随培养时间的延长，Ph值会增加
传代时间：72h （三天左右）
细胞来源：Sf9 （货号B825-01 ）和Sf21 （货号B821-01）细胞系
是传统的用于杆状病毒表达的细胞系，源于美国农业部昆虫病理
IPLBSF-21细胞系，来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织 .
（以上来自 invitrogen ）
细胞特点：.
标准条件的界说：
x d/ml （健康对数生长期细胞活率至少应不低于90%.活率低于
90%细胞不是在最佳条件下培养不能用于实验）1 x io1/mL将呈
现对数生长状态
传代培养：传代培养需将细胞调整到维持对数生长状态和最年夜活率.
贴壁培养：贴壁细胞传代需在细胞长成单层（如下界说）然后
1: 5 （细胞体积：最后培养基体积）
层细胞可以传代培养
悬浮培养：在细胞密度到达 x W - xw1细胞/mL后将密度 x id- x M细胞/mL进行悬¥? 度不高于4X 1。"个/mL或坚持密度高于1 x M个/mL以到达对数生长状态.
Sf9悬浮培养所需要的细胞数
培养基：sf- 900 m SFM （添加2%勺血清减小感染过程中卵白水解量）
培养瓶与培养体积：
冻存：
90%活率和80-90 %融合的要求（如：低代次）
融解细胞，它将会到达最佳使用状态.
.
存2-；
.将无菌冻存管立于冰上，做好标识表记标帜；
.室温400- .
.以给定的密度在冻存液中重悬细胞；
.移取1mL细胞悬液置于无菌冻存管中；
.置于-20C 1h,然后移至-80 C 24-48h;
.贮存于液氮中.
转染的细胞：需要的是对