文档介绍：2020
细胞生物学实验心得
染液配制注意
1、注意配方。龙胆紫用2％的醋酸配制和用水配制使用效果不同，前者较好
2、注意染液成熟。醋酸洋红染液、改良苯酚（石碳酸）品红染液、吉姆萨（Giemsa）染液配好后均需成熟一段时间，当时2020
细胞生物学实验心得
染液配制注意
1、注意配方。龙胆紫用2％的醋酸配制和用水配制使用效果不同，前者较好
2、注意染液成熟。醋酸洋红染液、改良苯酚（石碳酸）品红染液、吉姆萨（Giemsa）染液配好后均需成熟一段时间，当时染色效果不好
染液使用注意
龙胆紫染染色体时染色时间要短（不超过1分钟），并且最好加水分色
吉姆萨染液只能用于干燥的滴片标本，染色时加液要多或扣染，染色结束冲洗时要带染液一起冲洗
（五）压片技巧
三步曲：切、敲、压
二、关于细胞膜选择通透性的实验
常做实验：植物细胞质壁分离实验、死活细胞染色鉴定实验
常用材料：紫皮洋葱、水绵
其它可用材料?带叶肉细胞的叶下表皮、%中性红水溶液中泡过的洋葱内表皮
常用试剂：30％蔗糖、％台盼蓝染液
水绵（一种藻类）
涉及问题
1、选择性透性是活细胞的特性
2、造成质壁分离的机制？
3、质壁分离实验可用葡萄糖或***化钠做吗？
4、与质壁分离程度有关的主要因素？不透膜的溶质分子数
三、关于细胞计数
（一）细胞计数板的结构
第一种：5大方格，中间大方格组成为16×25（16个中方格，每个中方格内25个小方格）＝400
第二种：5大方格，中间大方格组成为25×16（25个中方格，每个中方格内16个小方格） ＝400
（二）计数板上标识数目含义
1/400mm2：中间大方格共有400个小方格，每小格面积为1/400mm2
：计数板底部到盖玻片的高度
（三）计数板使用方法
清洁－盖片－加样－计数
清洁：先用水，再用药棉蘸取75%酒精
加样：液滴接触盖玻片的边缘，使悬液通过毛细作用渗入计数室
计数范围
压线细胞计数原则
（四）细胞悬液密度计算
计两大格的计算方式：
细胞密度（个/ml）＝（2大格细胞总数/2）×104 ×稀释倍数
16格×25格的血球计数板计算公式：
细胞数／ml=4中格内细胞个数和/4×16×104×稀释倍数
25格x16格的血球计数板计算公式：
细胞数／ml=5中格内细胞个数和/5×25×104×稀释倍数
四、关于细胞涂片制备
材料：单细胞悬液
涂片易出现问题：太厚或太薄不便观察；动物细胞带水太多缓慢干燥引起失水
解决方法：用样减少；用固定液；用抗凝剂后离心
血涂片染色用的瑞氏（Wright）染液染色方法
先用蜡笔对选定的区域划线（用作堤防，阻止染液扩散）；
然后滴加适量染液覆盖选定区域，染1分钟（液面应浮现一层金黄色金属物质，表示染液起了染色作用）；
，轻摇混匀，染色5min；
不要倒掉染液，流水或滴加蒸馏水直接洗去浮液
五、关于淀粉染色
染液：碘-碘化钾染液。配法：取碘化钾3克，溶于100毫升蒸馏水，加热使之溶解,然后加 入1克结晶碘溶解后，放于棕色瓶中保存。
使用：用于淀粉的鉴定时， 将其稀释3~5倍；观察淀粉粒上轮纹，需稀释100倍以上
马铃薯淀粉上的轮纹
花生淀粉
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