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一、关于动植物细胞染色体标本的制备
(一)取材
有丝分裂:植物根尖、茎尖;动物骨髓细胞、羽髓细胞、培养的血细胞等
减数分裂:植物花粉、动物精巢等
(二)材料固定
目的:
(1)迅速杀死细胞,防治细胞自溶、***;
(2)使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态。
(3)利于染色。
常用固定液:卡诺氏固定液,用于固定染色体标本的配方为CarnoyⅠ(甲醇:冰醋酸=1:1)
使用方法:15-20倍于固定材料的固定液固定数小时至过夜
(三)材料保存
固定好的组织可长期保存于70%酒精中
(四)染色
组织压片染色体制备常用染液:醋酸洋红染液、改良苯酚(石碳酸)品红染液、龙胆紫染液
细胞悬液滴片常用染液:吉姆萨(Giemsa)染液
组织整染技巧:切碎染
染液配制注意
1、注意配方。龙胆紫用2%的醋酸配制和用水配制使用效果不同,前者较好
2、注意染液成熟。醋酸洋红染液、改良苯酚(石碳酸)品红染液、吉姆萨(Giemsa)染液配好后均需成熟一段时间,当时染色效果不好
染液使用注意
龙胆紫染染色体时染色时间要短(不超过1分钟),并且最好加水分色
吉姆萨染液只能用于干燥的滴片标本,染色时加液要多或扣染,染色结束冲洗时要带染液一起冲洗
(五)压片技巧
三步曲:切、敲、压
二、关于细胞膜选择通透性的实验
常做实验:植物细胞质壁分离实验、死活细胞染色鉴定实验
常用材料:紫皮洋葱、水绵
其它可用材料?带叶肉细胞的叶下表皮、%中性红水溶液中泡过的洋葱内表皮
常用试剂:30%蔗糖、%台盼蓝染液