文档介绍：办公室：疟疾防制科 0879-2141182
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血膜制作
血膜染色
影响染色效果的因素
主要内容
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血膜制作（血膜分类）
用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血膜格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人，
涂2个厚血膜1个薄血膜，
以防血膜脱落而影响检查；
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
标本片
发热病人血片
标签
标签
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厚、薄血膜的位置
每张载玻片上可做1个薄血膜和1个厚血膜，如图

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各种不同的疟疾血片涂制法：
标准血片
门诊发热病人血片
居民普查血片
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血膜制作（涂片操作）
血膜编号血膜制成后，立即用特种蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的号码，以防差错，待薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受检者的个人编号，依次顺序插入标本盒内。
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血膜制作的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片表面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推出的血膜均匀一致。
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血膜制作的注意事项
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不易溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，凉干后应及时装入标本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段时间，让醇、醛等物质挥发后才能使用，以免厚血膜红蛋白被其固定，不能溶血导致染色效果不佳。
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血膜制作的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜，并对厚血膜溶血。夏天标本尽可能24~48小时内固定、溶血和染色；冬天也不能超过72小时。放置时间越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定，然后用蒸馏水（或过滤的清水）对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。
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血膜染色一、染液的种类及染色原理
染液种类：
对镜检疟原虫染色虽然种类名称很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的多***染液变化过来的。
多***染液可分为水溶液和醇溶液两类。水溶液类有罗氏（Romanowsky）染液、费氏(Field)染液等；醇溶液有吉氏（Giemsa）染液、瑞氏（Wright）染液等。
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血膜染色（一）染液的种类
醇溶液类:
有吉氏（Giemsa）染液、瑞氏（Wright）染液等。是在水溶液染液的基础上改进发展而成。目前我们推荐的是运用醇溶液类中的吉氏（Giemsa）染液
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血膜染色（二）染色的原理
染色原理是染料于被染物的阴阳离子互相吸附而结合的一种化学反应。
各种细胞和疟原虫主要是由不同的蛋白质或类氨基酸组成。不同的氨基酸均含有氨基（NH2）和羧基（COOH）。在游离状态时，氨基（NH2）获得一个氢离子成为带阳电的离子（NH3 + ）；而羧基失掉一个氢离子成为带阴电的离子（COO — ）。
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血膜染色（二）染色的原理
主要染料都含有美蓝、伊红和美蓝氧化后的天青。
美蓝的有色基团带阳离子，是一种碱性染料，用的是盐酸美蓝。溶于水后离解为带阴电的***离子和能着色的美蓝阳离子。
伊红的有色基团带阴离子，是一种酸性染料，染色用的是伊红钠盐。溶于水中时离解为带阳电的钠离子和带阴电的伊红离子。
天青为美蓝氧化而成。虽为碱性染剂，在染色中起染媒作用。
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血膜染色（二）染色的原理
伊红主要离解为酸性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的沈淀物染成红色。
美兰主要离解为碱性的美兰离子，在遇到酸性蛋白质如疟原虫、淋巴和大单核细胞的胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等即可结合染成兰色。
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血膜染色（二）染色的原理
美兰与伊红都不能使原虫和白细胞的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来只能染上极淡蓝色的结构染上显著的酸性染剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显著的既蓝又红的紫蓝色，而较小或菲薄的原虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
第三十三