文档介绍：茶叶中吡虫啉残留量的测定检验方法(共 2915 字) 1 实验部分 仪器、试剂与材料 Waters ACQUITY UPLCTM – TQD MS/MS系统(美国waters ) ;高速匀质机(德国 IKA ); 氮吹仪( anomation ); 离心机( 日本日立); 漩涡混合器( 德国IKA ); 电子天平(F A1104 , 上海天平仪器厂)等。阿维菌素标准品; 吡虫啉标准品(95% ) ;乙***(色谱纯) ;甲醇(色谱纯) ;乙***(分析纯) ;固相萃取小柱:氨基炭黑柱(500mg/ 6mL ) ;水为二次蒸馏水。 L棕色容量瓶中, 用甲醇( 色谱纯) 溶解并定容, 配制成5 00mg/L的标准储备液。 标准曲线取阿维菌素和吡虫啉标准储备液,分别用甲醇稀释配制成 5ng/mL 、 10ng/mL 、 50ng/mL 、 100 ng/mL 、 500ng/mL的标准工作溶液, 经液相色谱测定后建立两种目标物浓度与峰面积的回归方程。 色谱质谱条件色谱柱: UPLC ACQUITY BEH , 50 ×2. 1mm ,; 采用乙***和0 . 005mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱, 洗脱程0~1min , 20%A ; 1~ 4min , 90%A ; 4~5min , 100%A ; 5~7 min,20%A。流速:;柱温:4 0℃;进样量:10 μ L离子源:ESI,正离子模式;毛细管电压:4. 0kV ; 离子源温度: 110 ℃; 脱溶剂气温度350 ℃; 脱溶剂气流量: 800L/hr ; 锥孔反吹气流量50L/hr ; 锥孔电压: 40v ; 扫描方式: 多反应监测(MRM ) ;离子对:吡虫啉,256/ (定量离子对) ,256/209;阿维菌素, /(定量离子对) ,。 2 分析步骤 ()均匀试样,用5 mL水将试样润湿, 放置5min , 加入5g无水硫酸钠和 15mL乙***, 涡动3min , 超声5min , 5000r /min离心5min , 将上清液转移至浓缩瓶中。用10 mL乙***再提取一次, 合并提取液。将提取液于50 ℃水浴下用旋转蒸发仪浓缩至近干, 在残渣中加入2 . 0mL甲醇+二***甲烷溶液,备用。 +二***甲烷溶液(5+9 5) 预条件化, 加入上述待净化溶液, 用10mL具塞试管收集, 用2 . 0mL甲醇+二***甲烷溶液( 5+95 ) 洗浓缩瓶后淋洗小柱, 重复一次。将收集溶液置于50 ℃水浴中用氮气吹干, 残渣用1 . 0mL乙***溶解, 在漩涡混合器上混匀, μ m微孔水相滤膜后于高效液相色谱测定。 3 结果与讨论 工作曲线用流动相将混合标准溶液稀释成5ng/mL、10ng /mL 、 50ng/mL 、 100ng/mL 、 500ng /mL,以峰面积为纵坐标,目标化合物的浓度为横坐标, 绘制标准曲线。阿维菌素和吡虫啉的相关系数分别为R= 0. 9991和R=0 . 9985 , 回归方程分别为y=2 632x+1033和y=8150x+