文档介绍：沉降菌测试方法
沉降菌测试方法
1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养、试管、剪刀、镊子等装入盒中置电热干燥箱内180℃，2小时。
2、硫乙醇酸盐流体培养基（细菌），根据试验实际用量取若干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装至适宜的容器中，瓶塞封口，灭菌。硫乙醇酸盐流体培养基置33℃培养48小时，应无菌生长。
改良马丁培养基（真菌），根据试验实际用量取若干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装，灭菌。改良马丁培养基置24℃培养72小时，应无菌生长。
营养琼脂根据实际用量按一皿装15ml，分装几个皿来计算，灭菌。
%***化钠分装至7支试管，封口，灭菌。
3、把金黄色葡萄球菌用接种环刮一下，%***化钠试管中摇匀，作10倍系列稀释至10
-7，然后从10-5、10-6、10-7试管各抽取1ml，分别放入标号5#、6#、7#培养皿里，倒入营养琼脂摇匀，（营养琼脂不能太烫，以不烫手为准）待营养琼脂冷却后倒置放入33℃培养箱中培养48小时，48小时中取出观察计数，根据菌落数小于100cfu来决定用几号。
4、操作时，应用适当的消毒液对供试品表面或外包装擦拭消毒后，以无菌方法取内容物。取供试品3只接种于足以浸没供试品的适量培养基中。一只瓣膜接种于硫乙醇酸盐流体培养基中，轻轻摇动，使瓣膜与培养基混合，1支试管接种金黄色葡萄球菌对照用菌液1ml,作阳性对照，1支作空白对照。另取2只瓣膜接种于改良马丁培养基中，2支试管作空白对照。硫乙醇酸盐流体培养基置33℃培养，改良马丁置24℃培养阳性对照管培养48小时后应有菌生长。
5、结果判断：在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。培养14天后，若供试品管匀澄清，判供试品符合规定；若供试品管中任何一管显浑浊并有菌生长，判供试品不符合规定。
细菌内***试验步骤：
1、准备工作：
移液管：，1ml10支
试管：10ml×4支，试管架2个（大小）
烧杯40ml2个，锥形瓶2个
试验所用器皿需经处理除去可能存在的外源性内***，玻璃器皿置电热干燥箱内180℃干烤至少2小时。
细菌内***检查水10ml×4支
细菌内***工作标准品1支，每安瓿含内***10EU
鲎试剂 ×8支
同一批号3支瓣膜
浸提介质：细菌内***检查水
浸提介质体积计算公式：V==（ml）
×3=（ml）
把细菌内***检查水4支外表擦净打开，倒入烧杯中，，用锡纸封口，放进提前打开升温至37℃恒温培养箱中，。供试液贮存应不超过2小时。
注：V-浸提介质体积，单位为毫升（ml）
L-产品细菌内***限值，单位为细菌内***单位每毫升（EV/ml）
λ-所用鲎试剂灵敏度标示值，单位为细菌内***单位每毫升（EV/ml）
2、细菌内***工作标准品用细菌内***检查水1ml溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟。
①。
②。（阳性对照溶液）
③。
④。（供试品阳性对照溶液）
3、把8支鲎试剂外表擦净全部打开放进试管架中，***检查水，在旋涡器上混匀，其中2支作供试品管，2支作阴性对照管，2支作阳性对照管，2支作供试品阳性对照管。
；；；。封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37±1℃恒温器中孵育60±2分钟，然后取出观察结果，试管在孵育期间应避免任何振动。
4、结果判断：将试管从水浴箱中轻轻取出，缓缓倒转180若管内形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（＋），未形成凝胶或形成凝胶不坚实，变形并从管壁滑脱者为阴性（－）。阴性对照管均为阴性，阳性对照管，供试品阳性对照管均为阳性，试验有效，否则无效。若阴性对照管为阳性，表明鲎
试剂或检查水或实验器具受污染；若阳性对照管为阴性，表明鲎试剂或标准内***已失效，或鲎试