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第8章高效液相色谱法.ppt

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第8章高效液相色谱法.ppt

上传人:qinqinzhang 2022/5/25 文件大小:3.51 MB

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第8章高效液相色谱法.ppt

文档介绍

文档介绍:一、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph
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第一页,共四十三页。
液相色谱仪(2)
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第二页,共四十三页。
液相色谱仪(3)
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第三页,共四十三页。
,采用酸性水溶液;阳离子离子交换树脂作固定相,采用碱性水溶液;
基本原理:组分在固定相上发生的反复离子交换反应;组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大,保留时间长;
阳离子交换:R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H +
阴离子交换:R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH-
应用:离子及可离解的化合物,氨基酸、核酸等。
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第十五页,共四十三页。
四、 离子色谱 ion chromatography
离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一中技术,其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换容量的离子交换树脂作为柱填料,并采用淋洗液抑制技术和电导检测器,是测定混合阴离子的有效方法。
有关内容将在第十章第六节中讲授。
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第十六页,共四十三页。
五、 离子对色谱 ion pair chromatography
原理:将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子(对离子或反离子)加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物,使其能够在两相之间进行分配;
阴离子分离:常采用烷基铵类,如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子;
阳离子分离:常采用烷基磺酸类,如己烷磺酸钠作为对离子;
反相离子对色谱:非极性的疏水固定相(C-18柱),含有对离子Y+的甲醇-水或乙***-水作为流动相,试样离子X-进入流动相后,生成疏水性离子对Y+ X -后;在两相间分配。
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第十七页,共四十三页。
第八章 液相色谱法
一、液相色谱固定相
stationary phase of HPLC
二、液相色谱流动相
mobile phase of HPLC
第三节 液相色谱的固定相与流动相
high performance liquid chromatograph
stationary phase and mobile phase of HPLC
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第十八页,共四十三页。
一、液相色谱固定相 stationary phases of LC
1. 液-液分配及离子对分离固定相
(1)全多孔型担体
由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体;早期采用100μm的大颗粒,表面涂渍固定液,性能不佳已不多见;
现采用10μm以下的小颗粒,化学键合制备柱填料;
(2)表面多孔型担体
(薄壳型微珠担体)
30~40μm的玻璃微球,表面附着一层厚度为1 ~ 2μm的多孔硅胶。
表面积小,柱容量底;
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第十九页,共四十三页。
(3)化学键合固定相
化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相;
a. 硅氧碳键型: ≡Si—O—C
b. 硅氧硅碳键型:≡Si—O—Si — C
稳定,耐水、耐光、耐有机溶剂,应用最广;
c. 硅碳键型: ≡Si—C
d. 硅氮键型: ≡Si—N
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第二十页,共四十三页。
化学键合固定相的特点
(1)传质快,表面无深凹陷,比一般液体固定相传质快;
(2)寿命长,化学键合,无固定液流失,耐流动相冲击;
耐水、耐光、耐有机溶剂,稳定;
(4)选择性好,可键合不同官能团,提高选择性;
(5)有利于梯度洗脱;
存在着双重分离机制:
(键合基团的覆盖率决定分离机理)
高覆盖率:分配为主;
低覆盖率:吸附为主;
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第二十一页,共四十三页。
-固吸附分离固定相
种类:硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰***等;
结构类型:全多孔型和薄壳型;
粒度:5~10 μm;
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第二十二页,共四十三页。

结构类别:
(1)薄壳型离子交换树脂
薄壳玻璃珠为担体,表面涂约1%的离子交换树脂;
(2)离子交换键合固定相
薄壳键合型;微粒硅胶键合型(键合离子交换基团)
树脂类别:
(1) 阳离子交换树脂(强酸性、弱酸性)
(2) 阴离子交换树脂(强碱性、弱碱性)
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