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生物化学实验报告论
生物化学试验报告论 本文关键词:化学试验,生物,报告
生物化学试验报告论 本文简介:生物化学试验报告论文班级:质量121学号:20220844119姓名:。
三、核酸酶活性的测定
将甲苯胺蓝核酸琼脂溶化后,倒入平板中,凝固后,用直径为2mm的打孔器打孔,将琼脂取出,将待检酶液10ul,滴入孔中,置于加有湿棉纱的湿盒内,在37℃造就4h,阳性反响在孔的四周会出现1mm以上的粉红圈,测量粉红圈的直径。










四、
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度
、试验原理
考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合,这种结合具有高度敏感性。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色,最大汲取峰在465nm。当它与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色,其最大汲取峰变更为595nm,考马斯亮G250-蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高度敏感度。在必须范围内,考马斯亮蓝
G250-蛋白质复合物呈色后,在595nm下,吸光度与蛋白质含量呈线性关系,故可用于蛋白质浓度的测定。
、试验仪器及用品
试验试剂:〔1〕水;〔2〕标准蛋白液:牛血清蛋白〔〕;〔3〕染液:考马斯亮蓝G250〔%〕,
溶于50ml95%乙醇,再参加101ml浓磷酸,加蒸馏水定容到1010ml;〔4〕样品液:取牛血清白蛋白〔〕溶液,%NaCL稀释至必须浓度。
、试验内容及步骤
、标准曲线的绘制
、取7支干净试管,按下表进展编号并参加试剂
试剂
1
2










3
4
5
6
7
标准蛋白液〔ml〕
0






S水(ml)







考马斯亮蓝染液〔ml〕

















蛋白质浓度〔ml〕
0
10
20
40
60
80
未知
A595
0.075















、数据记录及处理
依据标准溶液的吸光度,在坐标纸上绘制出浓度-吸光度曲线,测出未知液的吸光度后,在标准曲线上查出未知液的浓度。
五、蛋白质亚基分子量测定SDS-PAGE凝胶电泳