文档介绍：微生物限度检查法
江苏省苏州药品检验所
细菌、霉菌(酵母菌) 计数
1简述(微生物限度检查的意义)
细菌、霉菌、酵母菌计数是检测规定企业单位内的非灭菌制剂污染的活菌数量,是判定药品受到微生物污染程度的重要指标,也是对生产企业的药品、原料、辅料、设备器具、工艺流程、生产环境和操作者的卫生状况进行卫生学评价的综合依据之一。
细菌、霉菌、酵母菌计数均采用平板菌落计数法,这是活菌计数方法之一,也是目前国际上许多国家常用的一种方法。
该方法以在琼脂平板上,每个细菌(营养琼脂)、霉菌(玫瑰红钠琼脂)、酵母菌(玫瑰红钠琼脂或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂)形成一个独立可见的菌落为计数依据。
测定结果只反映在规定条件下所生长的细菌(一群在营养琼脂上发育的嗜中温、需氧和兼性厌氧菌)、霉菌和酵母菌的菌落数。不包括对营养、氧气、温度、PH和其他因素有特殊要求的细菌、霉菌和酵母菌。
一个细菌、霉菌和酵母菌菌落均可由一个或多个菌细胞形成。因此供试品中所测的菌落数实际为菌落形成单位数(colony forming unit ,CFU),而不应理解为细菌、霉菌、酵母菌的个数。
微生物检验项目:细菌总数测定、霉菌与酵母菌总数测定、控制菌检验(包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、金黄葡萄球菌、破伤风梭菌)以及活螨的检验。
设备
无菌室
2 设备、仪器及用具
、避免潮湿、远离厕所及污染区(面积不超过10m2,)由缓冲间(2个)、操作间组成。
操作间与缓冲间之间应有样品传递箱,出入操作间和缓冲间的门不应直对。
无菌室内应六面光滑平整,能耐受清洗消毒。墙与地面及墙壁、天花板连接处应呈凹弧形无缝隙,不留死角。操作间内不应安装下水道。
无菌室内的照明灯应嵌装在天花板内,室内光照应分布均匀,光照度不低于300勒克斯。缓冲间和操作间均应设置紫外线杀菌灯(2~),紫外杀菌灯应距实验台面高度不超过1M,并应定期检查辐射强度,-2(1M距离)。不符合要求的紫外杀菌灯应及时更换。
、湿度无菌室内温度和相对湿度直接影响紫外杀菌灯杀菌效果,故温度应控制在18~26℃,相对湿度40~60%。操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压、。