文档介绍:货号:QS1403 规格:50管/48样
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GOD(EC )广泛存在货号:QS1403 规格:50管/48样
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GOD(EC )广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生 H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
测定原理:
GOD催化产生H O,过氧化物酶在有氧存在时催化H O分解产生的氧又将邻联茴香***氧化 、一 ,2 2 2 2
生成有色物质,颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、 蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体60mLX 1瓶,4°C保存;
试剂一:液体40 mLX 1瓶,4C保存;
试剂二:液体8 mLX 1瓶,4C保存;
试剂三:液体2 mLX 1支,4C保存;
样品测定的准备:
组织处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1: 5~10的比例(, 加入1mL提取液),进行冰浴匀浆° 8000g 4C离心 10min,取上清,置冰上待测。
血清(浆):直接检测。
测定步骤:
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至500nm,蒸馏水调零。
2、 GOD检测工作液的配制:用时将试剂二和试剂三转移至试剂一中,充分混匀,待用;用不
完的试剂4 C可保存一周;
3、 测定前将GOD检测工作液在37C(哺乳动物)或25C(其它物种)水浴10min以上。
4、 在1mL玻璃比色皿中加入40p L样本和960p L工作液,立即混匀并计时,记录500nm下 20s吸光值A1和1min20s后的吸光值A2。计算△ A=A2-A1。
GOD活力单位的计算:
1、 血清(浆)GOD活力的计算
单位定义:每mL血清(浆)每分钟催化产生1nmol氧化型邻联茴香***为一个酶活力单位。
GOD (nmol/min/mL) =[△ AXV 反总:(£ Xd)