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实验室常用试剂缓冲液配制.doc

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文档介绍

文档介绍:实验室常用试剂缓冲液配制
11M Tris-HCl ?组份浓度 1 M Tris-HCl Na2HPO4,2 mM KH2PO4
(,,) ?配制量 1L ?配制量 1L
?配置方法 1. ?配置方法 1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
? 重复操作步骤?。 1M Tris-HCl() 25mL
? Tris-HCl(),使用磁力搅拌器 M EDTA() 20mL 搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 20%Glucose() 45mL
? 重复操作步骤?,稍微残留部分上层水相。 dH2O 910mL
? 。 2. 高温高压灭菌后,4?保存。
? 将苯酚置于棕色玻璃瓶中4?避光保存。 3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的
RNase A(20mg/mL)。
8// ?配置方法 15Solution II ?组份浓度 250mM NaOH,1%(W/V)SDS
1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/***仿/异(质粒提取用) ?配制量 500mL 戊醇(25:24:1)。***仿可使蛋白(25 :24 :1) 质变性并有 ?配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。 助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现 10%SDS 50mL 的气泡。 2N NaOH 50mL
2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的***仿/异戊醇 2. 加灭菌水定容至500mL,充分混匀。 (24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4?保存。 3. 室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。
注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。
910W/VSDS ?组份浓度 10%(W/V)SDS
?配制量 100mL 16Solution III ?组份浓度 3M KOAc,5M CH3COOH
?配置方法 ~200mL烧杯中,(质粒提取用) ?配制量 500mL 加入约80mL的去离子水,68?加热溶解。 ?配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。
2. 。 KOAc 147g
3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。 CH3COOH
102 N NaOH ?组份浓度 2N NaOH 2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。
?配制量 100mL 3. 加去离子水将溶液定容至500mL。
?配置方法 4. 高温高压灭菌后,4?保存。
~200mL塑料烧杯中( EDTA ?组份浓度 M EDTA 溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。 () ?配制量 1L
2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。 ?配置方法 1. Na2EDTA•2H2O,置于1L烧杯中。
3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌。
4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。 3. (约20g NaOH)。 N HCl ?组份浓度 N HCl 注意:,EDTA才能完全溶解。
?配制量 100mL 4. 加去离子水将溶液定容至1L。
?配置方法 1. 5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。 (),均匀混合。 6. 室温保存。
2. 室温保存。 181 M DTT ?组份浓度 1 M DTT
125 M NaCl ?组份浓度 5 M NaCl ?配制量 20mL
?配制量 1L ?配置方法 1. DTT,加入到50mL塑料离心管内。
?配置方法 1. NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL 2. M 的NaOAc(),溶解的去离子水后搅拌溶解。 。
2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。 3. 适量分成小份后,-20?保存。
3. 高温高压灭菌后,4?保存。 1910mM ATP ?组份浓度 10mM ATP 1320W/VGlucose ?组份浓度 20%(W/V)Glucose ?配制量 20mL
?配制量 100mL ?配置方法