文档介绍：新生期不同剂量双酚 A 暴露对雌性大鼠青春发育的影响中文摘要
新生期不同剂量双酚 A 暴露对雌性大鼠青春发育的影响
中文摘要
目的:研究新生期不同剂量双酚 A(bisphenol A,BPA)暴露对雌性 SD 大鼠阴
道开口时间(vaginal opening day,VOD)、下丘脑 kiss-1 mRNA 及其蛋白 kisspeptin
表达和子宫、卵巢雌激素受体α(Estrogen Receptor,ERα)mRNA、雌激素受体β
(Estrogen Receptor,ERβ)mRNA 及其蛋白表达的影响。
方法:将新生雌性 SD 大鼠随机分为 6 组,即空白对照组、溶剂组、17β-雌二醇
-1 -1 -1
组(17 β- estradiol,E2,10μg·d )、低剂量 BPA 组(25μg·kg ·d )、中剂量 BPA 组
(50μg·kg-1·d-1)和高剂量 BPA 组( 250μg·kg-1·d-1),在生后第 0-6 天( postnatal day 0-6,
PND 0-6)经皮下注射每日给药。记录 VOD,并于当天处死大鼠,取出下丘脑、子宫、
卵巢并称重,计算下丘脑、子宫、卵巢脏器系数。对下丘脑组织行免疫组化检测观察
kisspeptin 定位,子宫、卵巢行 HE 染色观察形态变化。通过 Real—Time PCR 的方法
测定下丘脑 kiss-1 mRNA 和子宫、卵巢中 ERα、ERβ mRNA 表达量。通过 Western-blot
的方法测定下丘脑中 kisspeptin 及子宫、卵巢中 ERα、ERβ蛋白表达量。
结果:1. 对体重的影响:自 PND 0 至 PND 6 每日对大鼠进行皮下注射方式的
药物干预,对照组与各干预组间大鼠 PND 0 与 PND 6 体重未有明显差异(P>)。
-1 -1 -1 -1
2. VOD 记录显示与对照组相比,E2 组、50μg·kg ·d 和 250μg·kg ·d BPA 组 VOD 较
对照组提前(P<);溶剂组、25μg·kg-1·d-1 BPA 组 VOD 与对照组相比未有显著
差异(P>)。3. 下丘脑免疫组化结果提示 kisspeptin 多位于神经细胞上。4. HE
染色结果显示空白对照组、溶剂组、25μg·kg-1·d-1、50μg·kg-1·d-1 和 250μg·kg-1·d-1 BPA
组子宫肌层厚度、内膜厚度较 E2 组厚,卵巢卵泡发育度较 E2 组高。5. 脏器系数结果
显示,各干预组下丘脑脏器系数与对照组相比无显著差异(P>),但 E2 组子宫、
卵巢脏器系数较对照组明显降低(P<),溶剂组、BPA 干预组较对照组无明显
改变(P>)。 6. RT-PCR 结果显示,溶剂组、25μg·kg-1·d-1、、50μg·kg-1·d-1 和
250μg·kg-1·d-1 BPA 组下丘脑 kiss-1 mRNA 及子宫、卵巢 ER mRNA 表达水平较对照
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中文摘要新生期不同剂量双酚 A 暴露对雌性大鼠青春发育的影响
组未有明显差异(P>); E2 组下丘脑 kiss-1 、子宫 ERα、卵巢 ERβ mRNA 表
达水平较对照组明显降低(P<),子宫 ERβ、卵巢 ERα mRNA 水平较对照组
未有明显差异(P>)。7. Western-Blot 结果显示,溶剂组、25μg·kg-1·d-1、50μg·kg-1·d-1
和 250μg·kg-1·d-1 BPA 组下丘脑 kisspeptin 及子宫、卵巢 ER 蛋白水平较对照组未有
明显差异(P>); E2 组下丘脑 kisspeptin、子宫 ERα、卵巢 ERβ蛋白水平较
对照组明显降低(P<),子宫 ERβ、卵巢 ERα蛋白水平较对照组未有明显差
异(P>)。
结论:①每日皮下注射操作未对注射药物期间大鼠基本体重增长产生明显影响。
②下丘脑神经细胞上有 kisspeptin 表达。③新生期 50μg·kg-1·d-1、250μg·kg-1· d-1 BPA
暴露可引起大鼠青春期启动提前。④上述青春期启动提前并没有通过 kiss-1 基因表达
改变来实现,且未对其青春期启动时下丘脑、子宫、卵巢脏器系数,子宫、卵巢发育
形态及 ER 表达产生明显影响。⑤新生期溶剂及 25μg·kg-1 ·d-1 BPA 暴露未引起大鼠
-1
青春期启动提前。⑥新生期 10μg·d E2 暴露可引起大鼠青春期启动提前,且启动时子
宫、卵巢发育程度降低,子宫、卵巢脏器系数、下