文档介绍：实验二食品中细菌总数的测定
实验二食品中细菌总数的测定
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实验二食品中细菌总数的测定
实验2 食品中细菌总数的测定
目的
学****并掌握细菌的别离和活菌计数的根本方法和原理
了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中实验二食品中细菌总数的测定
实验二食品中细菌总数的测定
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实验二食品中细菌总数的测定
实验2 食品中细菌总数的测定
目的
学****并掌握细菌的别离和活菌计数的根本方法和原理
了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义
原理
菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得 1g或1ml检样中所含细菌菌
落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食
品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种
类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
3材料
食品检样
培养基
营养琼脂培养基，无菌生理盐水。
其它
无菌培养皿，无菌移液管，无菌不锈钢勺。
步骤
取样、稀释和培养
以无菌操作取检样25g〔或ml〕，放于225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内〔瓶内预
置适量的玻璃珠〕或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成
1:10的均匀稀释液。固体检样在
参加稀释液后，最好置灭菌均质器中以
8000～10000r/min
的速度处理1min，制成1:10的均
匀稀释液。
用1ml灭菌吸管吸取
1:10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有
9ml灭菌生理盐水的试管
内，振摇试管混合均匀，制成
1:100的稀释液。
另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制
10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换
用1支10ml吸管。
根据标准要求或对污染情况的估计，选择 2～3个适宜稀释度，分别在制作 10倍递增
稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
稀释液移入平皿后，将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液〔不含样品〕的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后，翻转平板，置 36±1℃温箱内培养 48±2h，取出计算平板内菌落数目，
乘以稀释倍数，即得每克〔每毫升〕样品所含菌落总数。
菌落计数方法
作平皿菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的
菌落总数后，求出同稀释度的各平皿平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不
能立即计数，应将平板放置于 0－4℃，但不要超过 24h。
菌落计数报告方法
平皿菌落数的选择
选取菌落数在 30～300之间的平皿作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平
皿平均数，其中一个平皿有较大片状菌落生长时，那么不宜采用，而应以无片状菌落生长的平
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皿作为该稀释度的菌落数，假设片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，
那么可以计算半个平皿后乘以 2以代表全皿菌落数。
稀释度的选择