文档介绍：仪器分析仪器分析第第11 11讲讲色谱分析色谱分析三三朱永法清华大学化学系 2主要内容主要内容?柱外效应; ?液液分配色谱; ?离子色谱原理; ?凝胶色谱原理; 3峰展宽因素峰展宽因素?柱前峰展宽是指由进样及进样器到色谱柱连接管引起的峰展宽。?柱后峰展宽主要由检测器流通池体积以及连接管所引起的展宽。?液相色谱的柱外效应比气相色谱严重和显著; 4液相色谱分离模式液相色谱分离模式一、吸附色谱( adsorption chromatography ) 原理: 基于被测组分在固定相表面具有吸附作用,且各组分的吸附能力不同,使组分在固定相中产生保留和实现分离的方法。固定相: 固定相通常是活性硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等固体吸附剂,所以吸附色谱也称液固吸附色谱,活性硅胶最常用。 5液固吸附色谱法液固吸附色谱法?流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据吸附作用的不同而进行分离的色谱方法称为液固吸附色谱法; ?液固吸附色谱法中最常用的吸附剂是硅胶,流动相是以烷烃为基的二元或多元溶剂系统; ?适合分离相对分子量中等的油溶性样品,对具有不同官能团的化合物和异构体具有较高的选择性; 6吸附色谱吸附色谱 1. 流动相: 弱极性有机溶剂或非极性溶剂与极性溶剂的混合物,如正构烷烃(己烷、戊烷、庚烷等)、二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/乙腈等 2. 流动相的选择原则是: 极性大的试样用极性较强的流动相,极性小的则用弱极性的流动相。 3. 混合流动相: 为了获得合适的溶剂极性,常采用两种、三种或更多种不同极性的溶剂混合起来使用,如果样品组分的分配比 k值范围很广则使用梯度洗脱 7应用应用 ,如农药异构体分离、石油中烷、烯、芳烃的分离。 8二、液液分配色谱二、液液分配色谱一般分为:液液色谱、键合相( bonded-phase )色谱?原理主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同(分配作用)而在两相中进行不同分配实现分离的液相色谱分离模式?和 GC 的差异相同的是:分离的顺序均取决于分配系数,分配系数大的组分保留值大;不同之处是流动相的性质对 GC 的分配系数影响不大,但对 LC 的影响很大。 9液液分配色谱液液分配色谱 : 是通过物理吸附的方法将固定液涂在载体表面,由于流动相的溶解作用或机械力作用,固定相容易流失, 导致保留行为的改变,重现性很差,引起分离试样的污染; : 以化学键合的方法将功能分子结合到惰性载体上,固定相就不会溶解到流动相中去; 10键合固定相键合固定相最常使用的全孔微粒硅胶( 3-10μm)是化学键合相硅胶,优点是: ①硅胶的强度大; ②微粒硅胶的孔结构和表面积易人为控制③化学稳定性好最常用的键合相键型是:硅烷化键合相,它是硅胶与有机硅烷反应的产物;