文档介绍：2017-5-16 第第第五五五章章章色谱分析法色谱分析法色谱分析法色谱定性鉴定方法色谱定量分析方法第六节第六节第六节色谱定性定量色谱定性定量色谱定性定量分析方法分析方法分析方法 2017-5-16 色谱定性鉴定方法色谱定性鉴定方法色谱定性鉴定方法 : 通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰,来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。利用加入法定性: 将纯物质加入到试样中,观察各组分色谱峰的相对变化。 2. 利用文献保留值定性相对保留值 r 21: 相对保留值 r 21 仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据,可以用来进行定性鉴定。 2017-5-16 Kovats 指数( Ⅰ),是一种重现性较好的定性参数。测定方法: ?将正构烷烃作为标准,规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以 100 (如正己烷的保留指数为 600 )。?其它物质的保留指数( I X) 是通过选定两个相邻的正构烷烃,其分别具有 Z和Z+1 个碳原子。被测物质 X 的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图: 2017-5-16 保留指数计算方法保留指数计算方法保留指数计算方法) lg lg lg lg( ')( ')( ')( ')( ')( ')( ')(Ztt ttI ttt ZR ZR ZR XR X ZRXRZR????????1 1100 2017-5-16 ( GC-MS ; LC-MS ) 色谱-红外光谱仪联用仪; 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 5890 D D C CB BA A A AB BC CD D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B BA A C C D D 2017-5-16 色谱定量分析方法色谱定量分析方法色谱定量分析方法 1. 峰面积的测量(1 )峰高(h) 乘半峰宽( Y 1/2 ) 法: 近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的倍: A = h·Y 1/2 (2 )峰高乘平均峰宽法: 当峰形不对称时,可在峰高处分别测定峰宽,由下式计算峰面积: A = h·(Y + Y ) / 2 (3 )峰高乘保留时间法: 在一定操作条件下,同系物的半峰宽与保留时间成正比,对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰(未完全重叠),可用此法测定峰面积: A = h·b·t R(4)自动积分和微机处理法 2017-5-16 2. 定量校正因子?试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比,即: m i =f i·A i?绝对校正因子:比例系数 f i,单位面积对应的物质量: f i =m i / A i?定量校正因子与检测器响应值成倒数关系: f i = 1 / S i?相对校正因子 f’ i :即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。?当m i、m S以摩尔为单位时,所得相对校正因子称为相对摩尔校正因子( f ’ M ) ,用表示;当 m i、m S用质量单位时,以(f’ W) ,表示。 i ss iss iis iiA Am mAm Amf ff????/ / ' 2017-5-16 3. 常用的几种定量方法(1) 归一化法: 特点及要求: ?归一化法简便、准确; ?进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大; ?仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 100 100 1 21??????????? ni ii iin iiAf Afmmm m c)( % ' '? 2017-5-16 (2) 外标法外标法也称为标准曲线法。特点及要求: ?外标法不使用校正因子,准确性较高; ?操作条件变化对结果准确性影响较大; ?对进样量的准确性控制要求较高,适用于大批量试样的快速分析。 2017-5-16 (3)内标法内标物要满足以下要求: (1)试样中不含有该物质; (2)与被测组分性质比较接近; (3)不与试样发生化学反应; (4)出峰位置应位于被测组分附近,且无组分峰影响。试样配制:准确称取一定量的试样 W, 加入一定量内标物 m S计算式: Ss iisiSs iis iAf AfmmAf Afm m ' ' ' ';??100 100 100 % ' ' ' '??????? Ss ii