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文档介绍

文档介绍:目录
抗菌多肽药物的制备方法 2
第一章文献综述 4
4
5
抗菌肽的一般理化性质 5
抗菌肽的生物学特性 5
5
6
生物ntimicrobial peptides are available and the synthesis of these peptides is expensive. Therefore, the aim of this study is to develop an effective strategy for producing antimicrobial peptides at relatively low cost. We firstly synthesize antimicrobial peptide genes with DNA synthesizer, the Escherichia coli was selected as expression system to produce antimicrobial peptides from the synthesized genes. Primers were designed according to the E. coli codon preference and amino acid sequence of antimicrobial peptides. Recombinant expression vectors were constructed and induce expressed in E. coli. Gene products were purified by hydroxylamine cut buffer to release antimicrobial peptides. Activity of antimicrobial peptides was detected by TTC microdilution.
Keywords : antimicrobial peptides; production process;
genetic engineering; antibacterial activity;
第一章I文献综述
抗菌多肽(antimicrobial petides,AMPs)是在生物体中具有抗菌活 性的肽类物质的总称,是宿主产生的一类能够抵抗外界病原体感染的小分子 蛋白,是生物体先天免疫系统的重要组成部分,对真菌,细菌,病毒,线虫 等具有广泛的杀伤活性[1]。抗菌多肽与传统的抗生素,化学药物在作用机制 上具有明显的差异,其抗菌谱广,作用强且迅速,不易产生耐药等,这些优点, 使抗菌多肽药物有望成为最理想的抗菌药物;近年来,有关抗菌肽的研究越 来越多,学者们就抗菌肽的分离纯化,氨基酸序列分析,抗菌肽作用机理研 究,蛋白质结构与功能分析,改造设计并合成新型抗菌肽,动植物的转抗菌 肽基因工程及抗菌肽基因工程等方面做了大量工作⑻。

抗菌肽的分类方式有很多,分类依据不同,其分类结果也不同:(1)根 据抗菌肽来源的不同,可以将抗菌肽分为动物源抗菌肽,植物源抗菌肽和微 生物源抗菌肽。动物源抗菌肽包括昆虫抗菌肽,哺乳动物抗菌肽,两栖类抗菌 肽,节肢动物抗菌肽,贝类抗菌肽,原索类抗菌肽,鸟类抗菌肽及鱼类抗菌肽 等;植物源抗菌肽种类繁多,可来源于多种植物,且存在于植物的各种组织 中,现已发现的植物源抗菌肽有硫素,转脂蛋白,knottin类抗菌肽,植物 防御素及橡胶蛋白类等;微生物源抗菌肽包括病毒源和细菌源,现已发现的微 生物抗菌肽有短杆菌肽S,多粘菌素,杆菌肽,乳链菌肽,多勃菌素E等。
[1]
(2)根据氨基酸序列和二级结构的不同,可以将抗菌肽分为a-螺旋型抗菌 肽,8-折叠抗菌肽,具有环形结构抗菌肽和伸展性抗菌肽。(3)根据所 [1]
带电荷的不同,可将抗菌多肽分为非阳离子和阳离子两种抗菌肽。(4)根
[1]
据抗菌蛋白的作用机制不同,可分为类亲环素蛋白,葡聚糖酶,脂转移蛋白,
核糖体失活蛋白,2S清蛋白类,蛋白酶抑制剂,几丁质酶,类几丁质酶,防 御素,类防御素蛋白等[1]

抗菌肽的一般理化性质
抗菌肽的分子量很小,一般是由30多个氨基酸残基组成,最多不超过50 个,大小在10kD以下;热稳定性高,通常在100 °。下加热十几分钟仍能保 持活性;水溶性好;抗酸碱能力强,在强酸强碱的条件下都能保持较高的活性; 具有 两亲性,大部分有阳离子特征;
抗菌肽的生物学特性
传统的抗生素仅对细菌有作用,而抗菌肽的抗菌谱广,不仅对革兰阴性 菌和革兰阳性