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PBS缓冲液配制.docx

文档介绍

文档介绍:Last revision date: 13 December 2020.
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、 KCl、 Last revision date: 13 December 2020.
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、 KCl、 KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是, 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl ; KCl ; Na2HPO4 ; KH2PO4 ;加蒸馏水 至 1000ml,调节pH 到 (用Na2HPO4或KH2PO4调节) 。
用于免疫反应时可加入 %叠氮钠( PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,%柳硫***。
PBS缓冲液配方
PH H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl Na2HPO4 NaH2PO4
根据经验来看,-,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl ,Na2HPO4?12H2O , KH2PO4 ,溶于900ml双蒸水中,,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。
十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~

1. NaCl 137mmol/L,KCl ,Na2HPO4 , KH2PO4