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文档介绍

文档介绍:转录组分析
研究背景:
RNA-Seq是通过结合实验和计算方法来鉴定生物样品中RNA序列的种类和丰度的一种技术。 通过RNA-seq,我们就能够确定单链RNA分子中ATCG的顺序。整个过程主要包括:从细胞 或组织中提取RNA分子转录组分析
研究背景:
RNA-Seq是通过结合实验和计算方法来鉴定生物样品中RNA序列的种类和丰度的一种技术。 通过RNA-seq,我们就能够确定单链RNA分子中ATCG的顺序。整个过程主要包括:从细胞 或组织中提取RNA分子、文库的构建以及后继的生物信息学数据分析。RNA-Seq技术具有 许多早期研究方法(如:微阵列)所不具备的优点,如:RNA-Seq平台的高通量、新技术所 带来的高灵敏度、发现新转录本、新基因模型以及非编码RNA的能力等。
RNA-Seq技术的到来,使人们认识到,无论是单细胞模式生物还是人类,我们对其转录组的 认知异常匮乏。而RNA-Seq产生的新的数据,则可以帮助我们发现基因结构上的巨大差异、 鉴定出新的转录本以及能够对small non-coding RNA和IncRNAs有着更好的了解。而且随着 测序花费的降低,RNA-Seq的优势体现的更加明显。
服务流程:
样品选取

利用Oligo-dT富集mRNA
mRN***段化
cDNA合成
末端修复、加polyA、加接头,PCR扩增
数据分析
测序方案:
内容:TotalRNA检测,普通转录组文库构建及测序及信息分析。
测序方式:HiseqPE125。
项目周期:有参45天,无参50天。
分析内容:
无参考基因组:






Reads的从头比对组装



、KEGG对差异基因进行功能富集分析

分析

有参考基因组:
(同无参)
Reads比对组装

、删除和连接体情况
、长度和覆盖度情况




SNV/Indel 分析
UTR分析

Non-coding RNA 分析

案例解读:
案例:通过poly(A)+ RNA-Seq分析Drosophila melanogast转录组的动态性
本项研究通过poly(A)+ RNA-Seq技术对果蝇的细胞系进行测序,鉴定出一批通过替换启动子 和RNA剪接来转录出大量转录本的神经特异性基因。通过后继分析还发现,对于RNA剪接 变化,组织间的差异要远远大于发育阶段间的差异。另外,发现性腺表达了成百上千的未知 的蛋白编码和lncRNAs,其中一些甚至是反义转录的。显示了果蝇转录