文档介绍：改良的降落PCR扩增中国地鼠目的基因
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山西医科大学学报 ( hn i dUnv 08年 l JS ax i)2 0 Me 0月，3 (0 9 1
文章编号： 10—6 1
改良的降落PCR扩增中国地鼠目的基因
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山西医科大学学报 ( hn i dUnv 08年 l JS ax i)2 0 Me 0月，3 (0 9 1
文章编号： 10—6 1 (0 8 1—0 7—0 0 7 6 12 0 )0 86 3
改进的降落 P R扩增中国地鼠目的基因 C宋国华一庞文彪 .,农业大学动物科技学院 )
张锐虎 刘田福 岳文斌 (山西医科大学试验动物中心，太原 000;山西，, 30 1
5 0bp 0
5 8 82 0 0bp 0
N DH5的引物均未扩增结果 (图 1。 A见 )
M. rkr .OX1基因片段；2 C X1C 2基因片段； Ma e;1 C, O .OX
3 N D 5因片段； . A H . A H基因片段 .A H基 4 N D 5N D 61—4扩增的碱基数分别是 10 6b,3 p 10 5b, 8 p 6 p 9 7b, 9 p 13 7b
图 2降落 P R扩增产物 (%琼脂糖电泳 ) C 1Rg2、d啪 I R珊Dut (l”p e di 1 aa s) 1 l a= C dc e￣ brt n% gm e s et o e
3M. re;1 N H5N H6基因片段； . OX Mak r . AD . AD 2 C 1基因片段； 3 C X1C 2基因片段；4 N H5基因片段 . O OX . AD
争论
在进展 P R扩增时，到很多参数的影响， C受这
些参数包括循环次数、 M、NT引物和模板， d P、通过转变这些条件来使产物
获得最好的效果。其中退火温度是影响 P R特异性的重要因素， C变性后温
图 1一般 P R扩增产物 (%琼脂糖电泳 ) C 1Fg1 C:ro C r ut e c p oe di% aa ) i ￣nfnP R po c l t hr e 1 g g l d s( e o t n
度快速冷却至 4 0—6 0℃,使引物和模板发生结可 22降落 P R扩增结果 . C采纳降落 P R扩增， C 4合。由于模板 D NA比引物简单的多，物和模板引之间的碰撞时机远远高于模板互补链之间的碰撞。 对引物的目的基因片段均在琼脂糖电泳中检测到， 片段大小约在 9 0—13 0 b 0 0 p左右，引物设计的与产物片段相符，电泳条带迁移状况来看，增从扩 P R产