文档介绍：关于菌种的管理和保藏
第1页，讲稿共35张，创作于星期三
菌种保藏的重要性
菌种保藏是微生物检验工作中的一项常规技术
科学保藏和管理关系到检验结果的正确性.
第2页，讲稿共35张，创作于星期三
菌种的—2015版指导菌落的操作技术。
方法平板划线 - 分段划线、连续划线
涂布分离法
倾注分离法等
第16页，讲稿共35张，创作于星期三
培养
接种后的培养基，根据不同微生物生长条件的要求，培养基放在适宜微生物生长的环境中温度、湿度、氧气等），使其生长繁殖的过程。
需气菌培养法:
厌氧培养法
嗜温性微生物：15℃～45℃。
嗜热性微生物：45℃以上。
嗜冷性微生物：15℃以下。
第17页，讲稿共35张，创作于星期三
培养后微生物的生长判断固体培养基有菌落生长或沿穿刺线扩散生长。液体培养基浑浊、菌膜、沉淀等。
第18页，讲稿共35张，创作于星期三
菌种的传代和使用
冻干菌种（0代）
↓
增菌培养苏醒（1代）
↓
增菌培养复壮（2代） → 分装冷冻保存
↓
斜面培养基
划线传代（3代） → 使用→ 分装冷冻保存
↓
斜面培养基
划线传代（4代） → 使用→ 分装冷冻保存
↓
斜面培养基
划线传代（5代） → 使用→ 分装冷冻保存
。
第19页，讲稿共35张，创作于星期三
斜面培养物1 ～ 3环
↓
适宜液体培养基5～10ml，培养18～24h 取适
当量，用灭菌生理盐水稀释后比浊（或预实验）
↓
按比浊结果或预实验将菌液稀释到相应倍数
↓
平板计数(取上述稀释液1ml加入平皿中加入
规定培养基、培养、点计菌落数
↓
实验、阳性对照

平板计数也可和试验同时进行
菌液的制备和使用
第20页，讲稿共35张，创作于星期三
修订前
修订后
营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基；
改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基。
胰酪大豆胨琼脂或胰酪大豆胨肉汤培养基；
沙氏葡萄糖琼脂或沙氏葡萄糖肉汤培养基；
马铃薯葡萄糖琼脂。
菌液制备用培养基—2015修订内容
第21页，讲稿共35张，创作于星期三
菌株
培养基
培养温度(℃)
培养时间( h )
枯草芽孢杆菌
铜绿假单胞菌
金黄色葡萄球菌
胰酪大豆胨琼脂
或胰酪大豆胨肉汤。
沙氏葡萄糖琼脂或沙氏
沙氏葡萄糖琼脂或马铃薯葡萄糖琼脂葡萄糖肉汤
30～35
20～25
20～25
18～24
2～3天
5～7天，或直到获得丰富的孢子
菌液制备用培养基—2015修订内容
第22页，讲稿共35张，创作于星期三
修订前
修订后
％氯化钠溶液
-蛋白胨缓冲液。
%无菌氯化钠溶液。
菌液制备用稀释液—2015修定内容
第23页，讲稿共35张，创作于星期三
菌液贮存—2015修定内容
修订前修订后
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时