文档介绍：白藜芦醇对宫颈癌细胞株Hela增殖的影响
【摘要】目的研究白藜芦醇诱导宫颈癌细胞株Hela的细胞生长和发育的改变,细胞周期的进行和凋亡等。方法 MTT法测定白藜芦醇对Hela细胞的作用。3H-TdR掺入法检测白藜芦醇对Hela细胞DNA合成的影响。流式细胞术分析细胞周期。结果白藜芦醇作用后,Hela细胞的增殖速度减缓,DNA合成减少。白藜芦醇在较低浓度时即可诱导较快的可逆的S期停滞。结论合适浓度的白藜芦醇可有效预防早期肿瘤,但不至于引起细胞毒作用和细胞死亡。
【关键词】白藜芦醇;细胞周期;宫颈癌;Hela细胞
ABSTRACT:Objective To study the effects of Resveratrol on the groent,cell cycle and apoptosis of cervical cancer cellsHela cells. Methods Measure the effects of Resveratrol on Hela cells by MTT. Detect the influence of Resveratrol on DNA synthesis of Hela cells through 3HTdR infiltration methods. Analyze cell cycle by floetry. Rusults After the treatment ore sloetry Suitable concentration of resveratrol could ffectively prevent tumor in early stage er Life Sciences)。
细胞培养
人宫颈癌细胞株Hela购自美国典型菌种收藏所(, Manassas,VA),RPMI 1640培养基加10%小牛血清,培养于37℃含5% CO2细胞培养箱。
细胞活力及成长测定
MTT法测定白藜芦醇对Hela细胞的作用[4]。即:将细胞以密度为1×104/孔接种于96孔板,培养12h后,加入不同浓度的白藜芦醇(~100 μM)继续培养。设立空白对照。细胞培养12h、24h、36h后加入MTT(5 mg/ml)继续培养4h,加100 μl DMSO,平板震荡仪上震荡5 min。酶标仪上波长560nm测定OD值。
DNA合成测定
Hela细胞1×104/孔接种于96孔板,培养12h后,加入不同浓度的白藜芦醇(~100 μM)继续培养。细胞中加入3HTdR ~,继续培养6h,然后收获细胞于玻璃纤维滤纸上[5]。烤干后,将滤纸放入闪烁杯中,每杯加闪烁液5ml,β液闪仪测定各管cpm。
流式细胞仪分析细胞周期
Hela细胞培养于6孔板一定时间,加入或不加白藜芦醇。培养不同时间后收获细胞用PBS洗,混于冷的70%乙醇中4℃过夜。然后细胞用冷PBS洗,再用PI/RNase A溶液37℃孵育20min,上机分析[6]。
统计学分析
数据用SPSS 10. 0软件处理,计量资料用均数±标准差(±s)表示,检验用于检测组间差异。P<。