文档介绍：摘要
植物胚胎发生是指单细胞的受精卵经过一系列受控的细胞分裂和分化,发
育为成熟的多细胞种胚的过程,也是一个基因有序的选择性表达调控的过程。
胚胎发育各个时期特异表达或调控的基因正被陆续揭示出来。
拟南芥胚胎发生基因,编码真核转录激活因子的同源蛋白,
在正常情况下仅在胚性细胞和胚乳中表达,单独就可以诱导体细胞向胚性细胞
的转变。
本研究设计特异引物,分别从拟南芥和水稻总中通过扩
增,得到特异片段,克隆到载体,以一为引物测序,
中比对,获得了基因。
将克隆的目的基因克隆到植物表达载体中,将其置于
启动子下游,并通过和酶切实验验证,获得了在植物中组成型表达
的表达载体。提取表达载体质粒,用酶切质粒,使其成线型,通过花粉
管通道法分别转化了恢复系釉稻,和不育系培矮
将的转基因一代种子潮霉素筛选发芽后,抗性苗大田种植,从叶
片中分离其总,以启动子上的一段序列为上游引物,基因特异
的下游引物为下游引物,进行检测。花粉管通道转化法的转化效率为
。所获得阳性克隆植株用于后续的研究。
导入拟南芥基因的不育系获得胚乳发育缺陷的种子。将胚乳缺陷的
种子于无激素的培养基中培养,其中有一株发芽,长成外观正常的植
株,另一株则只长出根。提取其,以上述的引物进行检测,为阳性转基
因个体。
不经授粉,转基因不育系得到具有萌发能力的种子,说明基因在单
子叶的农作物水稻中能促进胚胎发生。有望通过基因在水稻中的人工调
控表达的基因工程方法实现水稻的无融合生殖,从而实现杂种优势固定的梦
想。
关键词水稻胚胎发生基因克隆遗传转化
一】
妙
勿
妙
一
硕士论文植物胚胎发生基因的克隆及其对水稻的遗传转化
缩写词
缩写词中文名英文名
氨节青霉素
碱基对
互补脱氧核糖核酸
澳代十六烷基三甲胺
天
双重蒸馏水
焦碳酸二乙酸
脱氧核糖核酸
浪化乙锭
乙二胺四乙酸钠盐
重力加速度的倍数
克
卡那霉素
小时
潮霉素
异丙基一硫代半乳糖普
细菌培养基
毫克而
分钟而
毫升而
信使
培养基
美国国家信息中心
光密度
开放阅读框
聚合酶链式反应
核糖核酸
每分钟转速
反转录
秒
十二烷基磺酸钠
三羚甲基氨基甲烷
硕士论文植物胚胎发生基因的克隆及其对水稻的遗传转化
单位
微克
林微升
澳氯一异丙基一一半
乳糖昔
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果尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发
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确的说明并表示了谢意
研究生签名衬一愿导时间,。,年‘月日
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研究生签名衬一时间年‘月声一日
导师签名厂乡矛入一一时间石了一飞名月石介
硕士论文植物胚胎发生基因的克隆及其对水稻的遗传转化
第一章绪论
植物胚胎发生基因调控的研究进展
植物的胚胎发生是指从单细胞的受精卵到多细胞种胚的发育分化过程。一般来
说,植物的胚胎发生可分为三个时期原胚期,球形胚一心形胚过渡期,器官形成与
成熟期〔。
传统的植物胚胎学研究对胚胎发育过程进行了大量细胞形态描述水平上。细致的
光学显微镜和电子显微镜的工作为目前的胚胎发育的分子生物学研究奠定了坚实的
基础。近年来,人们获得大量的植物胚胎发生的突变体,同时结合分子生物学技术,
克隆了许多重要的基因,并对这些基因的表达调控进行了研究。胚胎发育各个时期特
异表达或调控的基因正被陆续揭示出来。
原胚期—极性建成
极性,是指物质向特定方向移动的趋势或倾向,反映在细胞水平上,就是细胞分
裂之前,胞质组分不均匀分布,向某一方向局部聚集,聚集端和没有聚集的一端之间
就形成了极性。受精卵极性的建立是胚胎发育的第一步。
第一个发现与建立极性有关的基因是。该基因的突变体造成
胚胎失去根部和下胚轴。年,蔡南海实验室的成功地利用标签
技术分裂到该基因。基因在整个的发育过程中持续表达,编码