文档介绍：鱿鱼酶解工艺条件的优化
一、 实验目的：
1、探索酶解觥鱼的最佳工艺条件
二、 实验原理：
以蛋白质水解度为主要指标，采用不同蛋白酶对觥鱼蛋白质进行了水解，根据 酶解效果确定适宜水解酶，以适宜水解酶组成复合酶对觥鱼肌肉进行水解，综 ml蒸 馏水，再放冷，加入玻璃珠数粒以防蒸馏时爆沸。
将凯氏烧瓶蒸馏装置如图1连好，塞紧瓶口，冷凝管下端插入吸收瓶液面下（瓶 内预先装入50ml，40g/1硼酸溶液及混合指示剂2〜3滴）。放松夹子，通过漏斗 加入70〜80 ml，400g/1氢氧化钠溶液，并摇动凯氏瓶，全瓶内溶液变为深蓝色， 或产生黑色沉淀，再加入100ml蒸馏水（从漏斗中加入），加紧夹子，加热蒸馏， 全氨全部蒸出（馏液约
250ml即可），将冷凝管下端提离液面，用蒸馏水冲洗管 口，继续蒸馏1min，用表面皿接几滴馏出液，以奈氏试剂检查，如无红棕色物生 成，表示蒸馏完毕，即可停止加热。
为终点，记录盐酸溶液的消耗量，同时做一试剂空白试验(除不加样品外，从消 化开始操作完全相同)记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。
计算公式：粗蛋白氮的含量N^=( (V1-V2 ) X )/ m X 100%
V1 :样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml ；
V2 :试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积， ml ；
C:硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度； m:样品的体积，ml
: 1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；
(2)用甲醛法测水解液的氨基态氮的含量
吸取水解液10ml两份，分别置于250ml锥形瓶中，各加入50ml蒸馏水，其 中一份加入3滴中性红指示剂， 琥珀色为终点；另外一份加入3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛20ml，摇匀，静置 1min，。分别记录两次所消耗 的氢氧化钠标准溶液体积。
计算公式：氨基酸态氮含量=((V2- V1 ) X ) / m X 100%
V1 :用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积， ml
V2:用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积， ml
C:氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/l
m:测定用样品溶液相当于样品的质量，g
: 1/2N2的毫摩尔质量，g/mmol
补充：标准氢氧化钠溶液在滴定前要进行标定
方法：— 锥形瓶中，加50ml纯水，搅拌溶解。将盛有邻苯二甲酸氢钾溶液的锥形瓶内加 入酚酞指示剂1-2滴，在碱式滴定管内注入氢氧化钠溶液至零刻度以上，赶走滴 定管阀门下端的气泡，，记下此时滴定管内液面 位置的读数V始，然后用氢氧化钠溶液滴定。滴定至粉红色半分钟内不消失为 止，即可认为到达终点，记下此时滴定管内液面位置的读数V末。计算公式
1. C(NaOH)= m(KHC8H4O4) = m(KHC8H4O4)
M(KHC8H4O4)V(NaOH) X V(NaOH)
2、五种蛋白酶单酶水解效果的比较：
本实验在底物浓