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白锄日期:加旁隆萑原创性声明学位论文使用授权声明日期:≯年占月弓日本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:本人在导师的指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行搜索,可以采用影印、缩印或者其他复印手段保存论文和汇编学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然是郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。
摘要研究背景食管癌是我国消化道恶性肿瘤之一,死亡人数约占全部恶性肿瘤死亡人数的,居恶性肿瘤死亡率第四位,仅次于肝癌,肺癌,和胃癌。目前认为早期发现、早期诊断、早期治疗是提高食管癌治疗效果的关键。早期治疗中临床手术治疗是食管癌的主要治疗手段之一,但切除后复发和远处转移严重影响了食管癌患者的治愈率和生存率。放疗和化疗虽疗效肯定,但其副作用严重影响患者生存质量。光动力学疗法利用光敏剂和合适波长的光,近多年已应用于许多肿瘤的临床治疗,包括食管癌癌前病变、早期癌根治治疗,晚期癌姑息性治疗。但是仍存在许多患者对Υ鸬拿舾行缘拖拢并已成为临床食管癌光动力治疗的难题之一,因此弄清影响食管癌光动力学疗效的因素及其作用机制将有助于寻找提高俅擦菩У男路椒ê托滤悸凡针对不同肿瘤患者制定合理的个体化治疗方案,从而提高患者疗后生存率。以往的研究提示多种因素能够影响Ч庑┮蛩爻∮玫墓饷剂、光波长和氧分子以外,还包括肿瘤细胞的生物性状缦赴只刺、机体的免疫状态、细胞内某些促凋亡基因和抑凋亡基因的表达水平与活性水平等。由于光动力学效应需依赖分子氧的存在,氧分子的缺乏能够导致单态氧产量不足,,细胞内水平增加。魑R恢肿B家蜃樱芗せ疃嘀只虻谋泶铮促红细胞生成素⒀9苣谄どひ蜃⒍嘁┠鸵┗还有一些与能量代谢有关的酶类,均与细胞存活、增殖、血管生成、侵袭、耐药等相关,因而锌赡苡跋斓搅俅睵的疗效。除此之外,据报道证实灿胂赴蛲鱿喙兀捎赑对肿瘤细胞杀伤的重要机制之一就是诱导细胞凋亡,推测谋泶锼接锌赡苡跋斓絇的杀伤效应,因而蛋白的表达状况对вΦ挠跋旒捌渥饔没剖俏颐茄芯康闹匾D摘容之一。要
研究目的研究方法研究结果本研究利用化学诱导法建立食管癌细胞缺氧模型,,观察鞍滓种坪蠖訮细胞杀伤功能的影响,为临床上通过调控基因表达而提高牧菩У於ɡ砺酆褪笛榛本研究共分为以下两部分:第一部分,长效抑制泶镌靥宓墓菇ḿ定和稳定细胞株的筛选。第二部分,干扰鞍子盏急泶锒允彻馨┫赴动力学效应的影响。菇℉.种圃靥澹ü赴榷ㄗH镜姆椒ń⒊ばб种鞍妆泶锏氖彻芰郯〦赴辏Q芯科溆跋霵效应的功能奠定基础。。┫赴鸓处理后的细胞存活率与细胞凋亡率,明确谋泶镉胧彻芰郯┕舛ρ应的关系。輘干扰原理,利用和在线设计软件以及软件设计扇判蛄小菰靥宀迦胛坏憬玸扇判蛄凶;晃猻序列;ü菇ǖ玫降挠行Ц扇胖柿T靥遄H救胧彻芰郯┫赴赴中,应用倒置荧光显微镜的观察,蛋白印迹法确定蛋白干扰效果。肕法检测抑制鞍子盏急泶锵赴岸哉障赴Q跏鄙ぷ刺对比观察盏急泶锛耙种朴盏急泶锏南赴赑处理后的细胞存活率。。摘要
;以此蛄猩杓瞥鰏序列,连接载体,筒庑蚪峁证实成功构建重组质粒;以此重组质粒转染食管鳞癌细胞系,荧光显微镜观察和鉴定结果表明成功得到能抑制蛋白诱导表达的稳定细胞系。в盏挤ǔ晒⒘耸彻芰郯┤,无显著性差异。赴鸆化学诱导后,..:邢灾圆钜,表明鞍椎谋泶镆种屏薖作用效果。魇郊觳釶后的细胞凋亡,..赴橛...:,至少部分是通过抑制细胞凋亡而实现。晒⒘...