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要摘巴西橡胶树是天然橡胶的主要来源,而乳管是橡胶合成与贮存胶乳的器官,乳管的分化和排列数是影响橡胶产量的主要因素。机械损伤能够诱导橡胶乳管的分化,荣莉酸,侵参锘邓鹕说墓丶藕欧肿樱岳蛩岽砟艽碳は鸾喝楣芊化,但目前对茉莉酸诱导乳管分化的机理及信号途径还知之甚少。为了克隆橡胶乳管分化相关基因,本文首先利用高密度基因芯片印迹杂交技术从本实验室构建的橡胶树机械伤害诱导乳管分化的树皮抑制性差减杂交目庵屑觳獾几个差异表达的危礁鐾阉睾鸵桓鯪转录因子基因,这些基因似乎都与植物脱水生理功能相关。利用技术,我们扩增了B家蜃拥娜ǔ序列。该序列全长为,其中开放阅读框有嗦氲鞍孜个氨基酸,其蛋白等电点为肿恿吭嘉斜J谼结合结构域┒撕途哂凶录活性的序列多态性┒耍哂蠳转录因子的典型特征,因此将该基因命名为。.%,无规则卷曲约占.%,其中无规则卷曲为主要结构;、、和的同源性分别为%、%、%、%、%和%。为了进一步了解该基因的功能,我们做了以下鉴定研究:冒攵縍泶锓治觯芯苛薍虻谋泶锾匦裕和ü鸾菏,二不同组织肿印⒔喝椤⑹髌ぁ⒏亢鸵镀中的差异表达分析显示,基因在种子中表达量最高,其次为叶片、胶乳和树皮,根部表达量最低。另外,不同处理的差异表达分析发现,机械伤害对基因的表达影响不明显。在六种植物激素生长调节剂碇校琀虻谋泶锵灾芡崖渌和乙烯利诱导,甲基茉莉酸对基因的表达有轻微诱导作用,细胞分裂素统霉素对表达有抑制作用。瓾淖B蓟钚约ǎ航甯霾煌ざ鹊腍蚱尾迦瓽甤载体,通过转化酵母对基因进行转录因子转录活性分析,分析结果显示基因薉结合结构域没有转录活性,而全长序列和私构域显示转录活性。将私峁褂蛩醵毯蟮淖B蓟钚苑治龇⑾郑覥末端缩减个氨基酸,其转录活性不受影响,当缩减个氨基酸后,转录活性消失,说明此段序列是转录结构域是必需的。瓾南赴ㄎ唬翰捎肳訦赴ㄎ唤性げ猓果发现:在细胞中定位的可能性依次为:细胞核赴细胞膜。。首先构建基因的诤媳泶镌靥澹.
然后利用农杆菌侵染叶盘法将该融合表达载体转化烟草,提取代转化烟草叶片总⒗肞技术检测,证明基因全长片段已整合入烟草总校胞定位分析等转基因植株长大后可以进行。瓾虻囊糯;芯浚何A送ü糯;醇℉虻墓能,我们构建了基因的植物过度表达载体和基因与转录抑制序列的融合表达载体,然后利用农杆菌ㄇ秩灸饽辖婊ㄐ颍直鹗栈代种子,目前还在进行潮霉素抗性筛选。转化植株将进行干旱和脱水实验,以验证其是否参与植物脱水相关的生理途径。歉叩戎参锼赜械囊焕嘧B家蜃樱⒐惴捍嬖谟诓煌闹参镏校斡氩煌条件、不同发育期下植物基因的表达调控,在植物对外界的各种生物和非生物因子的胁迫应答及植物的发育、生长中起关键的调控作用。易宓囊恍┳B家蜃邮擒岳蛩信号途径的关键环节,因此研究橡胶树蚬δ芏杂诮沂咎烊幌鸾荷锖铣傻骺机制具有重要意义,本研究对于阐明茉莉酸调节乳管分化的信号途径和揭示形成层细胞向韧皮部一侧的分化机制具有重要意义。关键词:巴西橡胶树B家蜃乳管分化表达调控
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