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时间:肼鹿独创性声明关于论文使用授权的声明时间:劫,/年石月岁日C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签导师签名:时间:≯伊∥年∥月弓日
徽俐啦哉\雾氛穴萄阮缸枷,蓝胃雪铷’中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表话论文题目尹双辉专业预防兽医学培养单位芯克⒅行兰州兽医研究所硕职称博导留硕导函论文作者研究方向指导教师才学鹏姓名单位签名导师≯硕导留呙矗博导猪圆环病毒鸵驴堑鞍撞《、贝侈口,
摘要,猪圆环病毒琍的感染与断奶仔猪多系统衰竭综合,姆⑸芮邢喙亍饕7⑸芰渥兄恚疾≈碇饕A俅脖硐治Iせ郝⑻逯丶跚帷⒑粑选⒒起恪⒏剐骸⑵ぱ住淋巴结肿大和病毒血症,致死率在ァブ洹腥颈鲜澜缧苑植迹殉晌N:ρ硪到康发展的重要病冈之一。国内外相继注册了包括灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗,在预防感染中发挥了重要作用。由于抗原制备成本居高不下,导致市场供应的各种疫苗单头份价格在元人比币之间,高昂的疫苗价格严重制约了疫苗的推广使用。根据基冈编码的主要免疫原性蛋白哂性谔逋庾晕易樽俺刹《狙帕特点,结合蛋白表达技术,我们首次利用￡表达的重组蛋白在体外制备鞍譜为研制疫苗奠定了基础。玃编码完整鞍谆钥寺〉酱行》核匮鞍投嗑圩榘彼×的原核表达载体校;寺【闖感受态细胞,将鉴定为陬缘闹刈橹柿命名为狢。将狢转化到表达感受态细胞一斜泶镏刈榈白。利用狿缬究晒鄄炫俨糠种刈榈鞍滓运苄孕问奖泶铮缀筒阄龃炕康牡鞍滓缘一特异性条带出现,人小约为庖哂〖鞘匝楹虴试验均证实重组表达的鞍拙有良好的反应原性,命名为—肧鞍酌盖谐刈榈鞍譎——系腟昵缀筒阄龃炕蠡竦貌淮有任何氨基酸残基的“天然鞍大小为@琂透射电镜观察蛋白能够自我组装形成直径大小的,形态结构类似与亲本堪祝芄缓蚉清抗体反应并形成抗原抗体复合物,说明￡表达的重组蛋白能够形成正确病毒农壳结构。獺.—虸呙绶直鹈庖咝∈蟆@眉浣覧可检测剑白特异性抗体。检测发现,外周血中的细胞因子一、虸—泶锪坑兴系鳎利用流式细胞仪检测三种乖庖咝∈蠛旌焓蓖庵苎猅淋巴细胞亚群的变化的结果表明,空白组馨拖赴苁肟乖庖咦橹渫臣蒲Р钜煜灾,而不同抗原之间的疶淋巴细胞总数、疌虲疌馨拖赴苁桶俜致什钜觳幌灾媚擅琢6纫羌觳庵票傅腜人小,然后以其作为抗原接种猪,以疫苗作为免疫对照。抗原免疫猪后产生的抗体消长规律同疫苗基本一致,免疫后的猪在旌蠓⑸固逋琹转,直剑免疫后天,抗体仍然表现为上升趋势。淋巴细胞增殖试验和流式细胞仪的检测结果表明,不同类型的乖梢源碳せ宓腡和拖赴疫反应,一虸虸—谕庵苎V械暮棵飨愿哂谖疵庖咧怼以上研究结果证明体外制备的疫苗有确实的刺激机体体液免疫和细胞免疫’关键词;猪圆环病毒停灰驴球堪祝徊《狙帕#换詊撼桃咔幻庖咴征琕的反应的能力。●
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录目鞍譜奶逋庵票负兔庖哐灾恃芯俊基因组结构和牛物学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..感染和致病的分子机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..疫苗研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.《狙帕R呙缪芯拷埂研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯鞍椎目扇苄员泶锖图ā毒株、菌种、表达载体、抗体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.泶镆锷杓坪蚈蚶┰⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.刈槿诤螩的表达、可溶性鉴定和反应原性鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.研究背景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯