文档介绍:中国农业科学院学位论文苏云金芽胞杆菌基因功能的研究指导教师:宋福平研究员申请学位类别:理学硕士业:生物化学与分子生物学究方培养单位:植物保护研究所研究生院提交日期年密级:论文编号:硕士研究生:陈榛专研向:微生物分子生物学与基因工程
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一师雠:躲研究生躲俅研触躲弘、霖时唑幽忡菝慨如『『年否月多时间:乃//年踟/独创性声明关于论文使用授权的声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究:作及墩得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中小包含其他入已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文鱮本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中固农、科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用一绞皆诓同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。明确的颐鞑⒈硎玖诵灰狻
‘\\圳嘲磅硼辆矧毛位以硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表中研究员培养单位芯克论文题目苏云金芽胞杆菌基因功能的研究生物化学与微生物分琁物’’:论文作者陈榛专业研究方向分子生物学与牲凶一褐指导教师植物保护研究所硕姓名职称单位专业签名硕导√生物化学孙长坡副研究员教授河北农业大学中国科学院微生研究员博导、/物研究所微生物学博导√尘物技术研究所植物病理学生物技术研究所分予生物学录厥柬长龙论文答辩时间地点年瑊物保护研究所第一会议帘评国家粮食局阅科学研究院硕导口人郭巍败辩主刘刚席陈明冯洁放郎志宏贝/口’
摘要成由蚪谢虮嗦氲纳背婢宓鞍苏云金芽胞杆菌虺艬因其有杀虫效果好、对人类无害等优势,成为了目前世界上田间应用最为广泛的生物杀虫剂。它的显著特点是在形成芽胞的同时,能够生,简称D壳把堪司芽胞期的基因表达调控以枯草芽胞杆菌为模式研究得较为深入,而芽胞早期虻骺氐难究较多,芽胞晚期对虻谋泶锏骺匮芯亢苌佟芽胞杆菌在芽胞期的母细胞中存在四个级联调控的转录因子、凰是芽胞期母细胞内重要的时序调控因子,调节母细胞中大量基因的转录。其中、作为因子负责识别特异性的启动子序列,而切》肿恿康奶匾煨越岷系鞍祝詏蛉因子控制转录的相关基因起调控的作用。目前,中如何对虻谋泶锏骺刈饔没共清楚。本论文利用基因重组技术敲除了苏云金芽胞杆菌曛械膅颍菇薵因缺失突变菌株酶呖奖丛靥錺携带基因及其启动子序列在中表达,得到基因的过量表达菌株::J紫龋颐敲魅妨薵蚴茄堪晚期表达的基因并且在芽胞期的后期一直处于高水平的表达。通过观察,在表型上,基因的缺失延迟了芽胞的裂解时间,使得活芽胞的数量降低,影响了芽胞萌发的效率,但在对溶菌酶的耐受性方面较野生型菌株没有明显的差异;同时基因的过量表达使活芽胞的数量减少。在转录活性方面,基因的缺失并未影响蚱舳拥淖B蓟钚裕强梢允沟胹虻转录活性提高蹲笥遥鴖虻娜笔词沟胓虻淖B急蛔瓒稀4拥鞍妆泶锪可瞎察,基因的缺失没有明显改变鞍椎谋泶锪俊关键词:苏云金芽胞杆菌,芽胞,杀虫晶体蛋白,基因,突变
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录目第一章引言⋯⋯⋯⋯..⋯.....⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.苏云金芽胞杆菌概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芽胞形成过程的调节机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⒂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯本研究的立题依据和目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验材料⋯⋯..:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..暧胫柿!.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.┰⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯菌株生长曲线的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...活芽胞计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.话肴樘擒彰傅幕钚苑治觥芽胞的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.融合蛋白的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第三章结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.基因缺失突变菌株的构建与鉴定⋯⋯⋯⋯⋯