文档介绍：中国农业科学院学位论文业:预崭群腺病毒构建及免疫特性研究表达鸡传染性支气管炎病毒和鞍字刈指师:刘胜旺研究员申请学位类别:农学硕士方单位:哈尔滨兽医研究所提交日期密级:论文编号:硕士研究生:耿合员导教专研究向:动物分子病毒学与动物分子免疫学培养中国农业科学院研究生院月
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‘\\彬矽红功孝欷绕砍纫中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表王晓筠表达鸡传染性支气管炎病毒和鞍字刈橄俨《竟菇ḿ懊庖咛性研究培养单位芯克哈尔滨兽医研究所位论文题目动物分子病论文作者耿合员专业预防兽医学研究方向毒与免疫学指导教师刘胜旺硕姓名职称单签名导师评赵启祖研究员中国兽医药品监察所博导团副研究孟庆文博导口硕导口军事医学科学院军事涂长春兽医研究所扈荣良硕导团王秀荣答崔尚金委会议记录厥王永强论文答辩时间地点年展跏抟窖芯克醣ǜ嫣阅人旌辩主席贝口
研究一椎昼及研究生妣礅匆夏捐邸б蒳帆州年/月砂日帆刚年多月≯日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:
本研究以人拖俨《为载体,以地方分离株Ⅺ『/有效免疫摘要鸡传染性支气管炎,怯杉Υ拘灾苎撞《琺引起的鸡的一种急性、高度接触传染性、病毒性呼吸道疾病。妆湟且血清型众多,各血清型毒株间没有或仅有很小的交叉保护性,给该病的防治带来很大困难。疫苗免疫接种是预防和控制该病较为有效的措施之一。传统疫苗包括灭活苗和减毒活疫苗存在许多不足如减毒疫苗的安全性差、有毒力返强的潜在危险以及保存条件苛刻等;灭活疫苗存在免疫力不持久,用量大且制备过程复杂,费用较高等缺点。因此,开发新型疫苗如亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、呙纭⒆;蛑参锟墒秤靡呙绲戎鸾コ晌R呙缌煊蜓芯康娜鹊恪原基因和蛭M庠床迦氚谢颍ü妇谕粗刈榈姆椒ü菇肆街攴直鸨泶颕和鞍椎闹刈橄俨《ü齈鉴定、间接免疫荧光及检测证实和鞍自谥刈橄俨《局芯竦帽泶铩6灾刈橄俨《痉直鸫ù直鹛取第⒌趌⒌偷刈槎净蜃椋ü齈、序列测定表明,插入的外源基因遗传性稳定。对构建的重组腺病毒和亲本腺病毒的生长动力学分析表明,该两株重组腺病毒的毒价均达到/,而且重组腺病毒与亲本毒在生长动力学方面无显著差异。为进一步研究表达、鞍字刈橄俨《久庖哐匦裕捎昧礁霰曜冀衅兰郏阂皇侵组毒免疫鸡,检测抗体应答水平:二是免疫保护试验。将只ζ骄殖晌遄椋孔唬分别记为椤组、椤组和椤G叭槲J笛樽椋罅阶槲6哉兆椤T诩日龄时开始免疫,,旌用甋忧棵庖咭淮巍C庖咄揪段<∪庾⑸洌庖呒亮烤。槲疫苗株免疫组,滴鼻免疫,使用剂量为/珽组为亲本腺病毒免疫组。各组首免后分别于第、和杉G逡约觳饪固逅健检测结果显示,疫苗免疫组能够检测到一定水平的抗体,,分别裂解各重组腺病毒甋作为抗原,检测各组内每只鸡免疫后抗体产生情况。裂解ú《咀魑Q粜远哉铡=峁允荆刈橄俨《久庖咦樵首免后第天和第天均有一定数量的鸡只分别产生了针对和鞍椎目固澹妆鞠俨毒免疫组没有鸡产生抗体。首免后第天用慷局杲泄ザ静⒘鄄臁J匝榻峁示,攻毒后椤组、椤组和榈姆⒉÷史直鹞#%、.ァ%、%,各组死亡率分别为:.ァ%、.ァ、.ァ本研究结果显示,与疫苗株和亲本腺病毒相比,表达均能诱导机体产生抗体,并对毒强度攻击产生一定水平的保护作用,但是表达组腺病毒较表达鞍椎闹刈橄俨《径訧强毒的攻击提供较高的保护作用。本研究为开发鸡传染性支气管炎新型重组活载体疫苗提供借鉴。关键词:鸡传染性支气管炎病毒;基因;颍褐刈橄俨《荆幻庖咛匦和鞍椎闹刈橄俨《久庖吆蛋白的重
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录目一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯《靖攀觥肿硬≡⊙⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..刈榛钤靥逡呙纭第二章表达鸡传染性支气管炎病毒和鞍字刈橄俨《竟菇ㄓ爰ā材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..《净蜃榈奶崛和斡雙猻靥宓牧印⒖寺〖安庑颉和斡雙狢穿梭载体的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.刈榇┧笾柿9沧;《局柿WH綡术赴重组腺病毒的传代培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...刈橄俨《《镜味炔舛ḿ吧で叻治觥和鞍自谥刈橄俨《ü馐匝椤试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..Ⅳ.......................