文档介绍：谨以此文献给我尊敬的导师樊廷俊教授以及我的家人和所有关心帮助我的人
埽河闼毛蚶血红蛋白的类酚氧化酶性质及其抗菌活性研究学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:
学位论文作者签名:翻身理学位论文作者签名:捌驱签字日期:刎晗υ马既签字日期:幻晗缭禄萌独创声学位论文版权使用授权书签字日期:刃年夕月日明垫超直墓丝重要挂型童明趁:奎拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑な槭本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下论文被查阅和借阅。⒀?梢越宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荼嗳胗泄厥菘饨屑焖鳎梢采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊馀贪电子杂志社糜诔霭婧捅嗳隒吨泄J蹲试醋芸狻罚授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签字确的说明并表示谢意。事项:⒀S腥ūA舨⑾蚬矣泄夭棵呕蚧顾徒宦畚牡母从〖痛排蹋市
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毛蚶:斓鞍椎睦喾友趸性质及其抗菌活,芯摘要两种胁琁;,,是一种具有重要经济价值的海洋无脊椎动物,同时又是一类较特殊的含有血红蛋白琀的双壳贝类。因其没有赴狈φ嬲庖迳系目固濉⒚有类似脊椎动物的特异性免疫系统,因而只能依靠血细胞及体液因子的先天免疫反应来抵御外界环境中病原微生物的入侵,其中尤以血细胞在机体的防御机制中发挥主导作用。是存在于所有脊椎动物和部分无脊椎动物中的一大类具有可逆载氧能力的含铁蛋白,最近的研究发现其除具有运输氧气的功能外,还具有稳定血压、抗菌、运输硫化物、调节酸碱平衡等多种生物学功能,具有极高的理论研究价值。本研究拟利用凝胶过滤柱层析纯化技术和伺ㄋ跫际醮用姥O赴呀馕镏蟹掷氪炕龆厶搴退木厶逍问降⒍云渖灾式屑ǎ灰越鸹粕咸亚蚓⒖莶菅挎吒司⑺牧微球菌、大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、青霉、黑曲霉、面包酵母和裂殖酵母为指示菌,研究毛蚶和目咕钚裕⒁约酌鸦海萤荧光素类似物为化学发光探针,同时结合超氧化物歧化酶的特异性抑制实验对毛蚶和目挂鸹斫醒芯浚荚诮沂久繦在非特异性免疫反应中的作用并为进一步探索其分子机理奠定基础。本文利用伺缩技术从毛蚶血细胞裂解物中分离纯化出了三种组分,,.榉治狧牧礁鲅腔而凝胶过滤法测得的//,
,越鸹粕咸亚蚓⒖莶莞司退牧N⑶蚓腗、白的性质是一致的。综上所述,毛蚶和在发挥类活性时同时具有对毛蚶逋饪咕钚缘募觳饨峁⑾郑繦匀指锢际涎粜跃一金黄色葡萄球菌、,且其活性均可被异丙醇所进一步激活,而不为⒁让负湍蛩厮せ睢生物化学和酶性质检测结果表明,毛蚶对￡.底物的类活性的最适反应温度为℃、最适反应值为,℃、最适反应值为。和訪—、儿茶酚和对苯二酚均具有类活性,但不能氧化酪氨酸和苯酚;在最适反应条件下,对瓺⒍璺雍投员蕉拥腒捣直鹞.,匀瓺⒍璺雍投员蕉拥腒捣直鹞.,证明和M本哂卸璺用赣肫崦感灾实睦郟氧化酶抑制剂检测结果显示,亚硫酸钠、抗坏血酸、柠檬酸和半胱氨酸对和睦郟钚跃哂泻芮康囊种谱饔茫郊姿帷⒈搅螂搴土螂宓囊种谱饔较弱,表明毛蚶和⒒永郟钚允本袷且恢侄璺用感灾实腜金斤’《令剂和金属离子检测结果显示,能强烈抑制和睦郟性,、::虲对其类活性具有不同程度的抑制作用,’而对其类活性则具有显著的激活作用,且被抑制的类活性可被完全回复,说明毛蚶和=鹗舻鞍酌福際且恢趾現儿茶酚酶与漆酶双重性质且更像是一种几茶酚酶的含金属蛋白酶。分别为和/,但二者对大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、鳗弧菌和哈维氏弧菌等革兰氏阴性菌以及青霉、黑曲霉、面包酵母和裂殖酵母等真菌均没有杀菌作用。以甲醚化海萤荧光素类似物为化学发光探针对毛蚶抗菌机理的研究结果显示,毛蚶和芄徊生活性氧宜腞可为超氧化物歧化酶匾煨砸种疲说明和鶵的类型为超氧阴离子。由此可见,毛蚶和对革兰氏阳性菌具有杀菌活性,其杀菌活性的分子机理是通过产生超氧阴离子词迪值摹、和和/和/、中国海洋大学博士研究生学位论文Ⅱ
本文首次对毛蚶的类性质及其非特异性免疫活性的研究,对于揭示在无脊椎动物非特异性免疫系统中的作用以及呼吸蛋白分子的多重生物学功能具有重要的理论意义。关键词:毛蚶;血红蛋白;类酚氧化酶活性;非特异性免疫;抗菌活性毛蚶血红蛋白的类酚氧化酶性质及其抗菌活性研究