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一、知识点
,能替代基因工程的术语。
***段的特点。
,分别用限制酶Ⅰ、限制酶Ⅱ切割单独切割得到不同片段;同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时,得到另外的片段,据此分析该双链DNA分子结构及酶切位点情况。
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¢标记基因,那筛选培养基中加入显色底物和诱导物分别为?
:抗生素、生化标记、营养缺陷型标记的包括哪些(要能区分缩写符号)。
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、双子叶植物及动物的遗传转化过程中,应用最成功的间接转化法分别是什么
,检测外源基因的整合、表达、转录,分别可以采用哪些方法?
-修饰的现象,其生理意义是什么?
,是利用其哪个特点?
(cosmid)描述。
、l-DNA、Plasmid几种常用载体的装载量大小比较
:Apr、Tcr。它们分别含有一个单一酶切位点:PstI、SphI。若将一外源基因插入Apr中的PstI位点,那么转化子和重组子如何筛选,若插入SphI又如何筛选?
-DNA,DNA-RNA分子杂交的化学原理是什么(靠什么维持其双链稳定性)?
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,包涵体形成的原因是?
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、pUC18/19载体的组成元件及作用、简写所代表的含义。
、终止子、复制原点、目的基因、报告基因
,实际应用中主要有哪些方法?
二、专业术语
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三、思考题
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,如果在tetr中有一EcoRI的酶切位点,现用EcoRI切割载体进行基因重组,如何利用抗生素变化筛选含有插入片段重组体?如果EcoRI的酶切位点ampr又如何?(插入失活法)
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***断克隆(全过程)?
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-互补的方式筛选重组子,如何利用a-互补进行重组子筛选?(过程和原理)
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,利用BamHI限制性内切酶切割外源DN***断后,怎样进行这一重组过程?怎样选择重组的转化菌?如果利用PstI切割,又如何重组、选择?