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一
林业科学研究,:~

松材线虫和拟松材线虫不同株系. ,
酶电泳的研究
胡凯基杨宝君
摘要应用聚丙烯酰胺凝肢电诛技术对来自国内及日本、加拿大,法国、挪威的松材钱虫及拟
松材线虫株系作酶电泳的初步分析。结果表明,不同株系的苹果酸脱氢酶及纤维素酶酶谱各不相
同超氧化物歧化酶有条在不同株系中迁移率相同的酶带。松材线虫与拟杜材线虫在酯酶谱上差
异明显,但培养于裂褶苗、多毛孢和葡萄孢上的来自南京黑松上的同一求系线虫的酯酶谱也显示了
明显差异,表明了该酶的不稳定性。答氪酸草酰乙酸转氨酶是唯一可区分两种线虫的酶,松材线虫
,,可用于两种线虫的生化鉴定
肘可溶性蛋白质及过氧化物酶的分析,来检测到清晰可辨的酶带。
松材线虫和拟松材线虫. “一
在形态、致病性方面的部分重叠及兼具两种线虫部分特性的中间类
型的存在,给分类鉴定和实际工作带来很大的困难。。对两者分类地位的问题至今仍有不同
的看法。为此,一些研究者转而试图从遗传、生化方面阐明其关系。、、
】
、等先后对一些线虫抹系的酶作了研究。日本研究人员还试图探讨酶谱与
线虫致病性之间的关系。口等研究了探针技术用于鉴定线虫株系,并据分
析法认为日本的松材线虫有可能来自北美。”等还发现两个致病性不同的线虫株系在能
量代谢途径上存在差异。本文作者利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对来自国内外的个线虫
株系进行了种酶的电泳分析,以期为进一步认识松材线虫和拟抡材线虫的生化特性和分类
鉴定有所助益。
材料及方法
. 线虫株系
松材线虫株系为南黑南京,黑橙.、南马南京,马尾橙.∞—
—.、、广东深圳冯尾松、山末长岛,
黑松、、拿大,针叶树木削片、一日本,黑松。拟松材线虫为江西江西,马尾
松、四川四川,马尾松、法国,南欧海松..、加拿大,针叶树
木削片、挪威,针叶树木削片。线虫均在裂褶菌上保种至试验。
一—收稿

本文为年国家科委重点科技顶日橙材线虫病的研究部分内容.
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林业科学研究卷
. 线虫培养及酶液提取
。南黑线虫
同时还在多毛孢∞。漏斗法分离线虫,
蒸馏水冲洗,计数后浓缩,加浸提液℃,在冰浴上充分研磨,离,取上清
液作电泳样品对照样品为与线虫等体积的无线虫的培养菌,按上述方法提取,每电泳样相当
于~ 条线虫的提取液,酯酶则需条。
. 电泳’
为垂直极状聚丙烯酰胺凝碗电泳分离胶浓度浓缩胶。纤维素酰凝胶加入.
。
, 染色
酯酶:竖牢蓝—一醋酸萘酯法苹果酸脱氢酶及超氧化物歧化酶:双显色法。
纤维素酶:碘一碘化钾法。谷氨酸草酰乙酸转氨酶:见文献,过氧化物酶:一联
苯胺法。可溶性蛋白:三氯乙酸一考马斯亮蓝法。
结果
. 酯酶,
南黑、山东、江西三个株系具有较复杂的电泳谱,并且株系间差异明显见图同为多毛
孢上培养的南黑、山东、江西分别有、、条酶带。南黑与山东有条相同迁移率的酶带。
江西株系有条酶带,与南黑和山东共有的