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萍卷第翔动物学研究】.
年..
树晌组织乳酸脱氢酶同工酶的研究
郏子修钟金颤
汪西省科学院做生钉研究所
摘要
耐云南树聃心肌、肺、颁棘、孵旺、肾脏. 仔上朦、骨骼矾和太脑
种组织乳酶脱氢傍】同工荫进行琼脂褚鞋赃电分折。结果丧叭, 种组织均呈现为—型
和—型两种亚墓组台而成的种不同子形式同工酶。采甩分光光崖比色定屋祛蜊得种同工薛蛆
舟的相对酶活性。对其亚基和亚基百甘举以匣/ 皿蓥比率进行了统计分析。并就不同酶谱特征与
基翻襄选状况进行了分析讨论。
美曩凋:树鼬,乳酸脱氢酶同工醇,琼脂糖凝腔电袜
乳酸腕氢酶同工酶是由型和型亚基组台而成的四聚体结构,其亚基的
合成分别受基因和基因所控制。对于同工酶这类特异性蛋白质的分析有助干了解基
困表达和调控的多样性, 从分子水平上阐明物种多样性的分子机制, 被视为基因的生化
表现型.,, ., .,
Ⅱ,.,, , ,., .,。树翩酶
多态性方面的研究仅有对酸性磷酸酶的多态性分析,.。
, 其后作者曾对云南树嘲血请同工酶进行过电辣分析研究郑子修等,
。本文报道云南树嘲种组织的同工酶的电泳分析结果。
材料和方法
一实验材料树嘲采自云南省禄劝县,经室内
人工饲养一个月备用。均为性成熟健康个体, 体重一。腹股沟静聃放血后
立即剖腹取材。. 匀浆, 于
℃离,分钟,上清液置—℃冰箱备用。
、. 比妥钠一缓冲液中
., 加蒸馏水, —溶液制备. 电泳凝胶。电辣
率文年月日啦到, 。年月臼蟮届
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动物学讲究
.。电压, 电流。上样量为
】。
三、.
...配制, 辅酶., 氯化硝基四氯唑蓝
·, 。电泳凝胶覆盖染色液置℃
孵育分钟,经乙醇:水:冰醋酸.:.:.溶液脱色固定,水漂洗至酶区带呈
现。有序切割各区带另以等同空自凝胶为对照。用. 溶液洗脱定量, 干
】波长测定光密度值。统计种组织中种同工酶组分的相对酶活性及其平均值和个
体值变动范围。参照方法统计各同工酶组分亚基和亚基比率.,
。对同工酶谱照相记录, 用日本岛津型双波薄层色谱扫描仪进行透射直线
式光密度扫描记录,样品波长, 参考波长, 扫描速度为
/ 。,., :
结果和讨论
一
、对于同工酶等电点生化参数的分析, 有助于对不同分子形式同工酶特殊电泳行
为的理解李士鹏等, 。本文结果表明, 种组织的乳酸脱氢酶均呈现由—
型和—型两种亚基构成种不同分子形式的四聚体。由于各同工酶分子所带电
荷性质和数量的差异, 在电场中由阴极向阳极的分布依次为、、。、
和条明显的电泳区带。鉴同工酶的等电点偏低, 在。碱性
缓冲系统中向阳极的泳动速度最快, 而同工酶的等电点一般高于., 因而
在电泳中明显趋向阴极图, 图
二、用分光光度比色定量法对不同个体、组织的种同工酶组分进行定量分析, 测
得相对酶活性见表。从种工酶组分相对酶活性的变化显示出差异分明的不同代谢
类型所固有的酶谱特征。在心肌、大脑、颁下腺、肾脏组织中同工酶