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海洋放线菌基因组文库的构建和功能基因的克隆及序列探究.pdf

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海洋放线菌基因组文库的构建和功能基因的克隆及序列探究.pdf

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海洋放线菌基因组文库的构建和功能基因的克隆及序列探究.pdf

文档介绍

文档介绍:痡幽么砀甋.:篜
⑨作者签名:却牙作者签名:召锨基”娩导师签名:忉兰暨华中师范大学学位论文原创性声明和使用授权说明日期:》叫年步月弓、“原创性声明保密论文注释:本学位论文属于保密,在——年解密后适用本授权书。日期:测曷拊H日期:晗υ日规定享受相关权益。回童途塞握童后进卮;旦圭生;.旦二生;旦三生蕉查本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者完全了解华中师范大学有关保留、使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华中师范大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑非保密论文注释:本学位论文不属于保密范围,适用本授权书。本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说学位论文提交“咝Q宦畚娜氖菘中全文发布,并可按“章程”中的师期宁日硕士学位论文,’
⑨.为实验材料,随机机械剪切提取的总’.∽,效价达以稀有海洋放线菌蚐体连接,经包装蛋白包装成噬菌体后侵染宿主细胞甤荆菇ǜ镁甑幕组文库,并对该文库进行质量鉴定。稀有海洋放线菌文库的效价达痬玫个阳性克隆子,远远大于按覆盖率为接近ァ3晒菇ǖ南∮泻Q蠓畔呔鶶痬玫鲅粜钥寺∽樱对洞笥诎锤哺锹饰ゼ扑阒辽偎的鲅粜钥寺∽邮移骄迦肫纬ざ任刈槁释咏%。阳性克隆子保存于孔板中,.℃保存。所构建文库的各项指标均达到要求,,还需要进一步检测该文库中包含有生物合成基因簇的大肠杆菌的表达情况。实验后期成功克隆了稀有海洋放线菌姆呛颂翘咫暮铣酶錝吐被干锖铣苫虼睾诵那蚱巍8菁悍⒈淼姆畔呔鶱和卤化酶生物合成基因簇核心区的核苷酸序列保守区设计两对简并性引物,采用姆椒ɡ┰鯪吐被干锖铣苫虼睾诵那蚱危⑹褂梅肿由学软件进行了序列分析。所获得的两段基因片段大小分别为和,分别编码龊个氨基酸。这两段序列与海洋放线菌的和卤化酶生物合成基因簇核心区基因核苷酸序列的同源性分别为%和%。最终成功地获得了稀有海洋放线菌腘吐被干物合成基因簇核心区基因片段,该基因片段的获取将为分离全长基因簇以及研究该基因簇在生物合成中的功能奠定基础。化关键词:海洋放线菌;基因组文库;腺苷酰化结构域;色氨酸卤代酶;系统进硕士学位论文’
⑨%.鷐痬畂强%...ィ甌.℃.勰,篗硕士学位论文..甌×痬畂..琲,,.甇×.%甀.,甤..%;籥;;’
⑨⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯摘要·········⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···⋯“⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯·⋯····.·.⋯·⋯·⋯⋯⋯....⋯...⋯.⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯·“⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·····⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯··一⋯··“”⋯⋯·Ⅱ第一章绪论”海洋放线菌研究的历史⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯海洋放线菌的分布及种类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.@⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.硕士学位论文’
⑨.嘌实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”插入序列的随机剪切⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.羟泻驞的末端修复⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”.竦媚康拇笮∑┰觥.;⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验结果和分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..蜃镈的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯