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愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的疏松而无规则的,高度液泡化的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞
2-3周,愈伤组织开始形成。
再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根和芽等器官的过程。
3-5周之后,诱导出的新叶片和芽。
(二)影响植物组织培养的因素
1、外植体的选取
△不同植物的组织培养难度___________
△同一种植物的不同组织培养难度_________
差别很大
不同
如菊花的组织培养,一般选择_________植株茎__________________。
未开花
上部新萌生的侧枝
对于同一种植物材料,材料的_________、__________________等也会影响实验结果。
年龄
保存时间的长短
阅读教材,思考影响植物组织培养的因素有哪些?
2、培养基的配制
常用的一种培养基为___________
其主要成分包括:
:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S
:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
________:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
_________:生长素、细胞分裂素、赤霉素等
MS培养基
大量元素
微量元素
有机物
植物激素
使用顺序
实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素
有利于______,但_________
先使用细胞分裂素,后使用生长素
细胞既分裂又分化
同时使用
___________提高
3、不同植物激素使用顺序和使用量
①不同植物激素使用顺序
细胞分裂
细胞不分化
分化频率
②不同植物激素使用量
生长素用量比细胞分裂素用量
植物细胞的发育方向
比值高时
有利于根的分化、抑制芽的形成
比值低时
有利于芽的分化、抑制根的形成
比值适中时
促进愈伤组织的生长
4、环境因素:
不同的植物对各种条件的要求往往不同。
如进行菊花的组织培养,一般将
pH控制在__________左右;
温度控制在__________;
并且每天用日光灯照射_____。

18~22℃
12h
5、消毒
在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境。
1、实验操作流程
制备MS固体培养基
外植体消毒
接种
培养
栽培
移栽
二、实验操作
2、实验具体操作
(1).制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
①配制各种母液
配制母液时,大量元素浓缩__________,微量元素浓缩__________。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。
1mg/ml
4
10倍
100倍
②配制培养基。
按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液,配制MS培养基。
植物激素
在菊花组织培养中,可以不添加_________________,原因是菊花茎段组织培养___________________。
比较容易
③灭菌
将分装好的培养基连同其他器械一起进行
_________________。
高压蒸汽灭菌