文档介绍：毛勰私碳主席:勘谤昆虫病原线虫共生菌中基因的克隆与表达作者:导师:研究方向:答辩委员会┟陈榕庞义教授生化与分子生物学分子生物学与基因工程中山大学硕士学位论文专业:委员:
摘要不具有榈鞍椎幕钚浴K远运辛烁葱浴⑻岽浚⒚盖械袅巳诤系鞍字械关键词:昆虫病原线虫共生菌,基因,诤系鞍论文题目:业:硕士生:指导老师:,.〔硕暧爰庖艨蚊的幼虫有很强的口服毒性。这一类基因座的表达产物,被命名为署。其中的鞍妆蝗衔?赡芫哂斜S准に仵ッ的活性,可以干扰昆虫在发育过程中的形变。本研究用椒ù邮笛槭冶4娴隼コ娌≡叱婀采曛欣┰龅搅两/颉=饬礁龌蛄又罥靥迳希⒃诖蟪Ω司薪杏盏急达,得到了隤娜诤系鞍住S捎诟萌诤系鞍滓圆蝗艿陌逍问酱嬖冢油返玫搅丝扇艿腜蛋白。用鞍锥匀至鄢崮坷コ婷蘖宄妗⑿蔽埔蛾以及甜菜夜蛾的二龄幼虫进行了口服毒力测定,发现蛋白对以上三种试虫均没有毒性。这一结果说明蛋白单独表达可能没有杀虫活性。但由于本次研究中使用的生测试虫种类不足,因此这一结果还有待进一步证实。专
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缩略词Χ郾0纺旱缬氨苄青霉素碱基对大肠杆菌·
翮舌的深入研究有助于将其基因转入植物,或者构建高效表达系统生产杀虫毒素直接这一基因座中的两个基因分别被命名为脚慵和T贒/.的研转基因抗虫植物是近年来生物技术发展所带来的一项有效的害虫防治新技术。当前几乎所有成功地在转基因抗虫作物中转入的均为苏云金杆菌珺内毒素基因。虽然诙舅赜卸嘀掷嘈筒⒍远嘀掷コ婕捌它有害生物缰参锊≡叱有较强的毒性,但已有多篇文献报道害虫对西及转所基因抗虫作物产生了抗性。克隆新的杀虫毒素基因以开发新型抗虫植物,有助于延缓害虫对转基因抗虫作物的抗性压力,扩大转基因抗虫作物的抗虫谱。昆虫病原线虫共生菌是存在于昆虫病原线虫Φ滥谟胫セ莨采南妇U饫嘞妇嫫涔采叱娼肜コ嫣迥诤螅会在虫体内分泌杀虫毒素,在短时间内使昆虫致死。由于昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素具有高效、杀虫谱广的优点,已受到科学家的广泛关注。对这类杀虫毒素应用于害虫防治。≡叱娴幕蜃樽橹峁褂辛饲宄牧解,大大推动了其基因功能、蛋白结构、应用前景等方面的研究。其中的基因座,因为其表达产物极高的杀虫活性引起了科学家们的注意。后来究中,分别用完整的和缺失了的蜃泶锊锒孕〔硕暌约凹庖艨馕的二龄幼虫进行了口服毒性测试。发现完整的表达产物具有很强的毒性,而缺失了的表达产物没有毒性。因此可以断定对于泶锊锏亩拘允潜要的。本文采用传统的基因克隆与表达方法对基因表达产物的杀虫活性进行了研究。结果发现其对棉铃虫、斜纹夜蛾以及甜夜蛾的二龄幼虫都没有口服毒性。蛋白可能没有杀虫活性。这个结论还有待于更多生铡实验结果的证实。中山大学硕士学位论文陈榕昆虫病原线虫共生蕾中基因的克隆与寰选
第一章昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素的研究进展O忠衙枋龅墓采辛礁鍪簟!R旄司生的抗菌素,能抑制其它杂菌的侵染,为线虫的生长、发育和繁殖提供理想的环引言昆虫病原线虫共生菌是存在于昆虫病原线虫Φ滥诘囊焕嘞妇锢际先旧跣裕舫Φ栏司头⒐飧司渲校琗与斯氏属线虫采琍胍煨「耸粝叱共生S捎谙叱嬉还采春咸寰哂猩背婺芰η俊⑸背嫫坠愕挠诺悖已成为引人注目的新型生物杀虫剂琫。共生菌与线虫的共生关系可以概括为:共生菌存在于线虫的肠道内,线虫携带共生菌进入寄主昆虫体内,并将共生菌释放到昆虫的血腔中;线虫保护共生菌不受寄主免疫反应的影响;共生菌在昆虫血腔内繁殖,产生毒素和抑菌物质,导致昆虫患败血症,而在内死亡:共生菌能分解营养物质,提供线虫繁殖发育所需的营养;同时共生菌产境,.
9ィ压采牧礁鍪舨⑽R桓鍪簟R幻洹奁铱诖—妇胂叱娴墓采叵怠保幌衷谛矶嘌д咭讶鲜兜剑豪コ娌≡叱婀采昆虫病原线虫共生菌斯氏线虫和异小杆线虫的生活史及携带共生菌的形式明显不同,斯氏线虫在学家的重视。基于国内对这类细菌研究基础薄弱的现实,首先对一些基本知识及鞘且惶厥獾某Ω司葡妇蛭U庑┫妇氏跛峄乖敢跣浴..、!ǜ鲋帧!I篋口嬲认为寄主体内第一代是雌雄异体,其共生菌嬖谟谙叱娉Φ滥诘囊桓鎏殊囊状结构内:异小杆线虫在寄主体内第一代是雌雄同体,其共生菌则直接存在于线虫肠道内琫籔昆虫病原线虫对害虫有很强的致病力,其中起关键性作用的是共生菌颜龙9采置诓亩嘀挚咕兀泻芮