文档介绍：第卷第期中国预防兽医学报!
年月
传染性法氏囊病病毒结构蛋白基因的克隆与原核表达

彭志伟! !王笑梅!高宏雷!付朝阳!张厚双!包晓玮!冉多良
" 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所!黑龙江哈尔滨# 新疆农业大学!新疆乌鲁木齐$

摘要%利用技术扩增出的结构蛋白基因!将其克隆到表达载体中!获
得重组质粒命名为! 经& 酶切和序列分析鉴定表明! 插入的位置& 大小和读码框均正确’
检测表明!经重组质粒转化&诱导的受体菌! 能表达结构蛋白基因!
约! 表达量达到了菌体总蛋白的! 经等检测表明! 诱导表达的抗原蛋白能与
阳性血清发生特异性反应( 这为血清学诊断方法的建立打下了基础(
关键词%传染性法氏囊病病毒# 结构蛋白基因# 克隆与原核表达

中图分类号% # 文献标识码% 文章编号%

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传染性法氏囊病" !) 码病毒的非结构蛋白# 大的首先编码
是由鸡传染性法氏囊病病毒" 聚合蛋白" ) ! 然后再断裂成
!) 引起的鸡的急性&高度接触性&杀淋巴细也称& 和三
胞性的传染病( 在世界范围内引起了严重的经济损种蛋白( 片段为!编码" ) ( 含
失( 属双病毒科" ) 成有血清型特异性的能诱导中和抗体的抗原决定簇!
员!禽双病毒属" ) ( 由& 两个这些抗原决定簇为构象依赖性的! 其诱导的中和抗
片段组成( 片段大约为!包含两个部分体能被动地保护宿主免受的感染!它是病毒的
重叠的开放阅读框" ) ( 其中!小的在前!编主要宿主保护性免疫原( 是的另一主要结
收稿日期%
作者简介%彭志伟!男!硕士研究生!从事病毒分子生物学研究
通讯作者%
第期彭志伟!等传染性法氏囊病病毒结构蛋白基因的克隆与原核表达
构蛋白!构成病毒衣壳的主要成分!含有群特异性引物进行鉴定!并测序确证& 上海博亚’!挑
异性抗原决定簇!这些抗原决定簇是线性依赖性的! 选出的阳性克隆!命名为"
同时也有少量的中和抗原表位! 具有一定的免疫保将测序正确的阳性重组菌. 接

护性" 基因大小约为! 不同血清亚型种至的培养液& 含/ 氨苄青霉素’
的基因相对保守" 中!0 振摇过夜" 取过夜培养物 1接种于
近年来随着超强毒的培养液& 含 2 氨苄青霉素’中! 3剧

! 的出现!该病已经成为包括中烈振摇至为 4 时!取菌液作为
国在内的世界性引起养鸡业经济损失的最重要病对照!余下的菌液加入至终浓度为! 5
原!对本病的防治也提出了更高的要求" 随着基因工诱导表达! 后收菌!其中取出菌液!余下菌
程疫苗的成功开发! 如何区分自然感染动物和注苗液做超声波裂解! 分别收集上清和沉淀! 然后进行
动物是控制和最终消灭传染性法氏囊病的重要论题聚丙烯酰胺凝胶电泳和分
之一" 因而!建立一种诊断方法以区别注苗动物和感析!检测表达产物" 同时用未诱导的菌液作为阴性对
染动物! 成为传染性法氏囊病防制技术研究的重要照"
课题" 结构蛋白的成功表达!为进一步建收集的菌液以
立鉴别诊断方法提供了条件" 离心!用的重悬
沉淀! 离心! 用 6 的
材