文档介绍：基因工程原理名词解释
1. 共享引物PCR:利用3条引物扩增两种不同的DNA序列,其中一条引物与两种待扩增序列都互补,它与另两条引物分别组成两对PCR引物,此种PCR常用于细菌学鉴定,确定同一种属细菌的不同种类。
2. 多重PCR:在一次反应中加入多对引物,同时扩增一份DNA样品中不同序列的PCR过程。其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同
3. 不对称PCR:其原理是采用不同的引物浓度,经PCR扩增得到单链DNA。一般采用50~100:1比例的引物浓度,~。在PCR前25个循环中,主要生成双链DNA产物。在低浓度引物逐渐耗尽时,高浓度引物介导的PCR反应就会产生大量单链DNA,分离此扩增产物中单链DNA,利用原引物或扩增单链DNA序列内的另一条引物直接测序。
4. 锚定PCR:在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。
5. 反向PCR:利用连接酶将一段未知序列两端连接成环状,利用单一限制酶原点切开已知序列,据已知序列的碱基顺序设计3?端和5?端引物扩增未知序列。
6. 彩色PCR:用荧光染料标记引物的5’端,不同荧光标记的引物同时参加反应,扩增后的目的基因会分别带有引物5’端的染料,通过电泳或离心沉淀,肉眼就可以根据不同荧光的色泽判断目标基因是否存在及扩增基因的类型
7. 原位PCR:在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。原位PCR既能分辨鉴定带有靶序列的细胞,又能标出靶序列在细胞内的位置,
8. 定量PCR:广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量。狭义概念的定量PCR技术(严格意义的定量PCR技术)是指用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果(扩增效率为零)。
9. 差异显示PCR:是利用一系列的oligo(dT)引物,逆转录真核生物细胞中全部表达的mRNA,通过PCR扩增的方法,转换成cDNA双链,再利用变性聚丙烯酰***凝胶电泳,将有差异的片段分开,筛选出目的基因
差异显示PCR又称差异显示逆转录PCR(DDRT