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(优选)色谱分析法基础
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经典的分离方法:沉淀、蒸馏和萃取;
现代分析中,大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止,色谱方法是最为有效的现代分离分析手段!
概述
色谱法是一种物理化学分离方法。将这种分离方法与适当的检测手段相结合,应用于分析化学领域,就是色谱分析法。
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一、色谱法简介
色谱法早在1906年由俄国植物学家M·Rswett(茨维特)使用CaCO3粉末作为,石油醚作为,玻璃管作为,分离植物中色素时发现并命名的“色谱法”(chromatography)
色谱法是一种分离技术,其研究对象是复杂的混合物质。
固定相
流动相
色谱柱
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二、色谱法的历史
俄国植物学家茨维特Tsweet首先将这种层析现象用于分离植物色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素A、B,并将这种方法命名为色谱法——液-固色谱(是最先创立的色谱方法)
20年后(1931)Kuhn(库恩)为了证实蛋黄中的叶黄素是植物叶黄素与玉米黄质的混合物,参考了Tsweet的论文并采用的色谱法进行其研究工作(吸附色谱)
1938年,Martin(马丁)和Synge(辛格)采用水分饱和的硅胶为固定相,以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基酸并且提出了色谱塔板理论——分配色谱
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1951年,Martin和James采用气体作为流动相,以自动滴定仪作为检测器分析脂肪酸——气相色谱法。建立形成色谱学理论中有着重要地位的塔板理论和VanDeemter方程,以及保留时间、保留指数、峰宽等概念。
1952年,。在他们获得诺贝尔奖的论文中还指出“采用气体代替液体作为流动相分离各类化合物的可能性是存在的。”“如果流动相用气体来代替,对分离更有好处”,“使用非常细的颗粒填料和柱的两端施加较大的压差,应能得到较小的理论塔板商”
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1957年,Golay又提出了使用毛细管柱代替填充柱可获得极高的分离效率——毛细管气相色谱法
从此,气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生及其获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重要分支学科
1960年代,为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。
1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书,标志着高效液相色谱法(HPLC)正式建立。
1937-1972年,15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的!
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三、色谱的分类

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3)超临界流体色谱(SFC)
1)气相色谱(GC):
气—固色谱(GSC)、气—液色谱(GLC)
2)液相色谱(LC):
液—固色谱(LSC)、液—液色谱(LLC)
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吸附色谱法adsorptionchromatography
分配色谱法partitionchromatography
离子交换色谱法ionexchangechromatography
空间排阻色谱法stericexclusionchromatography
不同组份在固定相的吸附作用不同
不同组份在固定相上的溶解能力不同
不同组份在固定相(离子交换剂)上的亲和力不同
不同尺寸分子在固定相上的渗透作用
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