文档介绍：生物药物分析思考题
1. 生物药物的特点?p7
1)相对分子质量的测定 2)生物活性检查 3)安全性检查 4)效价测定 5)生化法确证结构
2. 生物制品的质量检定包括哪些方面?p14
生物制品的检定一般分理化检定、安全检定、效力检定三个方面
3. 生物药物常用的定量方法有哪些?p17
1)酶法 2)电泳法 3)理化测定法 4)生物检定法
4. 什么是电泳?如何对其分类,分别有哪些?p94
电泳是指带电粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。
按支持物,可分纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳及聚丙烯酰***凝胶电泳等。按凝胶形状分有水平平板电泳、圆盘柱状电泳及垂直平板电泳。
5. 影响电泳迁移率的因素包括?p95
1)带电颗粒的性质 2)电场强度 3)溶液的ph值 4)溶液的离子强度 5)电渗作用
6. 血清蛋白常用什么电泳技术分离?核酸常用什么电泳技术分离?p99
血清蛋白常用醋酸纤维素薄膜电泳技术分离,核酸常用琼脂糖凝胶电泳技术分离
7. 为什么聚丙烯酰***凝胶电泳是应用最广泛的凝胶电泳技术?p100
1)聚丙烯酰***聚合物分子中可解离的基因很少,因而电渗作用小,对样品的吸附作用很小,容易制备,并可再生吸收。
2)凝胶的孔径可以按需要控制其大小,因而具有可拉的分子筛效应,可以根据要分离物质分子的大小,选择适合的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的机械性质。
3)在一定浓度范围聚丙烯暗暗对热稳定。凝胶几乎无色透明,因而电涌结果易观察,可用检测仪直接测定。
4)丙烯酰***是比较纯的化合物,可以精制,减少污染。
5)聚丙烯酰***凝胶在280n波长处没有吸收,利于样品蛋白电泳后的扫描检测。
8. SDS-PAGE电泳用于测定?其中SDS的作用是什么?p102
SDS-PAGE电泳用于测定蛋白质的分子量。SDS的作用是使蛋白质所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的净电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应。
9. 核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素?p98
核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小、核酸分子的形状三个因素
10. DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有什么效应与什么效应?
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应
11. 聚丙烯酰***凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳,其定义和区
别分别是什么?p102 & web
12. 什么是分子筛效应?p95
分子筛效应:分子量或分子大小和形状不同的蛋白质通过一定的孔径分离胶时,受阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率,这就是分子筛效应。分子量小,阻力小,移动快;分子量大,阻力大,移动慢。
13. 什么是等电点?什么是等电聚焦?p107
等电点:蛋白质或***电解质(如氨基酸)所带净电荷为零时溶液的pH,此时蛋白质或***电解质在电场中的迁移率为零。
等电聚焦:使电泳的介质中形成一定范围的pH梯度,电泳时待分离的***分子可以在这种pH梯度中迁移,直到聚集于与其等电点相同的区域。该技术特别适用于分子量相近而等电点不同的蛋白质分离和分析。
14. 在生物大分子的高效液相色谱分离分析中,哪些是常用的分离
模式?各分离模