文档介绍：蛋白质的一级结构
Primary structure)
又称为共价结构或化学结构。它是指蛋白质中的氨基酸按照特定的排列顺序通过肽键连接起来的多肽链结构。
肽键:一个氨基酸的α-COOH 和相邻的另一个氨基酸的α-NH2脱水形成共价键。
1) 构成肽链的氨基酸已残缺不全,称为氨基酸残基;
2) 肽链中的氨基酸的排列顺序,一般-NH2端开始,由N指向C,即多肽链有方向性,N端为头,C端为尾。肽的颜色反应: 多肽可与多种化合物作用,产生不同的颜色反应。这些显色反应,可用于多肽的定性或定量
鉴定。如黄色反应,是由***与氨基酸的苯基(酪氨酸和苯丙氨酸)反应生成二硝基苯衍生物而显
黄色。
多肽的双缩脲反应是多肽特有的颜色反应;双缩脲是两分子的尿素经加热失去一分子NH3而得
到的产物。
双缩脲能够与碱性硫酸铜作用,产生兰色的铜-双缩脲络合物,称为双缩脲反应。含有两个以上
肽键的多肽,具有与双缩脲相似的结构特点,也能发生双缩脲反应,生成紫红色或蓝紫色络合物。
这是多肽定量测定的重要反应.
(二)天然活性肽
(GSH):三肽(Glu-Cys-Gly),谷氨酸-半胱氨酸-甘氨酸广泛存在于生物细胞中,含有自由的-SH,具有很强的还原性,可作为体内重要的还原剂,保护某些蛋白质或酶分子中的巯基免遭氧化,使其处于活性状态。
:三肽(焦谷氨酰组氨酰脯氨酸),可促进甲状腺素的释放。
:环十肽,含有D-苯丙氨酸、鸟氨酸,对革兰氏阴性细菌有破坏作用,主要作用于细胞膜。
:含有D—半胱氨酸和D—缬氨酸的二肽衍生物。主要破坏细菌的细胞壁粘肽的合成引起溶菌。蛋白质的结构
蛋白质是由一条或多条多肽(polypeptide)链以特殊方式结合而成的生物大分子。
蛋白质与多肽并无严格的界线,通常是将分子量在6000道尔顿以上的多肽称为蛋白质。
蛋白质分子量变化范围很大, 从大约6000到1000000道尔顿甚至更大。
蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。
(1)测定蛋白质一级结构的要求 p168
a、样品必需纯(>97%以上);
b、知道蛋白质的分子量;
c、知道蛋白质由几个亚基组成;
(2) 测定步骤 p168
。
通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系,即可确定多肽链的数目。
如果蛋白质只含一条多肽链,则蛋白质的摩尔数?(蛋白质分子量/110=蛋白质的摩尔数)应于末端基的摩尔数相等;若后者是前者的倍数,说明该蛋白质是由多条多肽链组成。
。p169
由多条多肽链组成的蛋白质分子,必须先进行拆分。
几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理,即可分开多肽链(亚基).
p169
几条多肽链通过二硫键交联在一起。可在8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍存在下,用过量的-巯基乙醇(还原法)处理,使二硫键还原为巯基,然后用烷基化试剂(ICH2COOH)保护生成的巯基,以防止它重新被氧化。可以通过加入盐