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文档介绍

文档介绍:植物组织培养
主要设备仪器的介绍
仪器设备
植物组织培养是在严格的无菌条件下培养植物材料。要达到无菌操作和无菌培养,就需要认为创造无菌的环境,使用无菌的器具,同时还需要人工控制的温度、光照、湿度等培养条件。无菌环境和无菌条件的创造需要一定的设备,实验设备因工作的目的、具体的任务和所具有的条件而异。但大多数采用化学实验室、微生物实验室及医疗上的一些设备、器材和用具。

无菌操作室
在植物组织培养中,无菌操作室(clean chamber)是进行植物材料的分离及培养体转移的一个重要场所。由于植物组织培养需长时间的无菌操作,所以无菌条件的好坏对组织培养成功与否起重要作用。微生物的培养生长时间短,而植物组织培养短的一个月,长的达几年。所以,防止细菌和霉菌混入是提高工作效率和影响生产成本的关键。
 
无菌操作室基本要求是:干净无菌、密闭、光线好。一般安装滑动门,使空气不致流动,以防外界菌及尘埃的侵入;墙壁光滑平整,地面平坦无逢,便于清洁工作;室内安装紫外灯,以便灭菌,还要有照明装置及灯座,以备临时增加设备之用;室内有超净工作台、移动式载物台(医用平板推车)、广口瓶、试管、三角瓶、酒精灯、接种工具等。面积根据工作性质可大可小,小的无菌操作室一般一间5~7㎡即可。
接种室内主要安放超净工作台,分单人使用和双人同时连续作业使用两种。超净台中准备接种用的器具,如尖头小镊子、弯头小镊子、接种针、解剖刀、手术剪刀等,以及酒精灯、储存70%酒精浸泡的棉球的广口瓶等。如果进行生长点或幼胚等细小结构的分离与接种,还应当在超净工作台内放置一台小型的双目解剖镜,以便观察、解剖和分离细小的外植体。
小型离心机主要用于分离和收集液体培养中的细胞、单花粉及原生质体等,也可用来筛选处于不同发育阶段的胚状体。
无菌室外最好设置预备室作为缓冲间,以防工作人员进出时带进杂菌。控温光照培养箱可以安放在缓冲间内。预备室与无菌室之间最好以玻璃相隔,便于观察和参观。在预备室可放置工作服、鞋、帽等,也需要装自来水和紫外灯。
(4)培养基配置室用于配制、分装培养基以及培养基的暂时存放。室内应配有各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管、移液器等器具;有平面实验台以及安放药品和器皿的各类药品柜、器械柜、物品存放架;有水浴锅、电饭锅、微波炉、过滤装置、酸度计、分注器以及贮藏母液的冰箱等。
(5)灭菌室用于器皿、器械、封口材料和培养基的消毒灭菌。要求墙壁耐湿、耐高温。室内需要备有高压蒸汽灭菌装置、细菌过滤装置、煤气灶和电炉等。
玻璃器皿和小用具的消毒常采用干热灭菌法,150℃约保持1-3h。培养基、蒸馏水及一些用具,采用120℃高压蒸汽灭菌法。
在没有条件的地方,可将上述工作合并在一个房间内完成,但设备的安装与排列要合理,房间要宽敞、明亮、通风。

组织培养中植物植物材料是生长在人工配制的培养基上,这就需要在化学实验室预先配制好培养基。化学实验室一般由以下几个部分组成:
(1)洗涤室主要用于培养容器、玻璃器皿、用具和培养材料的清洗。新购进的玻璃器皿一般先用1%盐酸除去可溶性无机物,再用中性洗涤剂;使用中的玻璃器皿可用洗涤剂清洗,自来水冲洗;对较难洗涤的器皿,如吸管等应用洗液进行洗涤。
洗涤室需备有工作台面、上水管和下水管、水池、落水架、电源、干燥箱等。
(2) 药品室用于存放无机盐、维生素、氨基酸、糖类、琼脂、生长调节物质等各种化学药品。要求室内干燥、通风、避免光照。室内设有药品柜、冰箱等设备。各类化学试剂安要求分类存放,需要低温保存的药剂应置于冰箱保存。有毒药品应按规定存放和管理。
(3)称量室根据需要,配备各类天平。要求干燥、密闭、无直射光照。一般配备1/100普通天平(coarse balance)和1/10 000的电子天平(sensitive balance),可能的话。加配1/1000和1/100 000的天平,形成系列。除电源外,应设有防震固定的台座。

培养室(culture room)是将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。需配有固定式培养架、旋转式培养架、转床和摇床、控温控光设备,以满足器官(芽、茎、花药等)、愈伤组织、细胞和原生质体的固体和液体培养的需要。
进行固体培养和试管苗大量繁殖时,培养材料通常摆在培养架上,制作培养架应考虑使用方便、节能、充分利用空间以及安全可靠。培养架材料为金属、铝合金或木制品。隔板可用玻璃板、木板、纤维板、金属板等,最好使用玻璃板或铁丝网,既透光,上层培养物又不受热。为使用方便,通常设计为5-7层,最低一层离地面高约50cm,以上每层间隔30cm左右,-。一般在每层上方装置日光灯以供补充光照,培养架长度通常根据日光灯的长度设计。宽度可根据工作情况而定,一般

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