文档介绍:厦门大学
硕士学位论文
H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒的研制
姓名:欧阳莹
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:陈亮
20090801
摘要�亚型禽流感病毒不仅能够感染几乎所有禽类,以其高致病性及死亡率严重危害养禽业的发展,还突破了宿主的种属屏障,直接感染人类,严重威胁了人类的生命健康,对�亚型禽流感病毒的快速检测十分重要。��椒ㄒ殉晌狧�切颓萘�感病毒快速检测的一种常用手段,目前常采用纯的核酸或灭活的病毒作为��觳�的质控品,存在稳定性及生物安全性等方面的缺陷。构建一个稳定的具有良好生物安全性的阳性质控品具有重要的意义。首先,利用������际踅獺�切颓萘鞲胁《綡术��虿糠中蛄蠬�克隆到能够表达耐核糖核酸酶的病毒样颗粒的表达载体上,转化大肠杆菌进行诱导表达。对得到的表达产物利用单双酶消化实验进行初步验证后,提取表达产物所包含的���蠷�狿�,并利用透射电镜观察蔗糖密度梯度离心后的表达产物的形态,结果表明已成功制备含�亚型禽流感病�基因���蔚牟《狙�帕!8貌《狙��粒能够耐受核糖核酸酶的消化,具有良好的稳定性和生物安全性。其次,通过选择不同的培养基,�值及��诱导时间优化了病毒样颗粒的诱导表达条件。并根据��删�迩�����蛄械姆肿拥骺鼗�贫员泶镌靥褰��优化,进一步构建了��琾�,���霰泶镌靥澹�岣吡瞬《狙�帕5牟�俊�最后,以�亚型禽流感病毒病毒样颗粒作为阳性标准品,通过均匀设计的实验方法优化了实时荧光��从μ逑担�⒆钪盏玫绞凳庇ü釶�检测�亚型禽流感病毒的阳性对照标准曲线,为�亚型禽流感病毒的准确定量检测提供了基础。关键词:�亚型禽流感病毒;病毒样颗粒;��删�鍀�序列;阳性标准品ⅥⅡ
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另外,该学位论文为��声明人�┟�:彦向阳至的研究成果,获得�璃助,在�属�辪厦门大学学位论文原创性声明��年�月��本人呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表的研究成果,均在文中以适当方式明确标明,并符合法律规范和《厦门大学研究生学术活动规范�孕�》。�翁�组��翁�组��鸦蚴笛槭业淖��笛槭彝瓿伞�请在以上括号内填写课题或课题组负责人或实验室名称,未有此项声明内容的,可以不作特别声明。�
“��槐C埽�视蒙鲜鍪谌ā�声明人�┟�:彦起户日莹厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文,并向主管部门或其指定机构送交学位论文��ㄖ街拾婧偷缱影�,允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索,将学位论文的标题和摘要汇编出版,采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于:�.经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文,于年日解密,解密后适用上述授权。�朐谝陨舷嘤�ê拍诖颉啊獭被蛱钌舷嘤δ谌荨1C苎�宦畚挠�是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文,未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的,默认为公开学位论文,均适用上述授权。�功明年呵月��月�
第一章前言��禽流感病毒的研究血清型分别称作警,乙,丙三个血清型,是根据流感病毒核蛋臼��和基质蛋岛��血凝素��赼�王挂专��,激�蜕窬�彼崦�毪��醝���,凇�覆煌��山獳王¥其中珏�最初在黑头鸥巾发现珏�Z�种驻蹙,帮�酢玁�バ汀H我恢众∮肴我�按照禽流感病毒类型的不同,禽流感可分为非致病性禽流感���、低致病