文档介绍：中国兽医杂志年第卷第期
亚型禽流感病毒多肽疫苗的初步研制
柯艳坤,齐岩,叶贺佳,张贺楠,陈晓春,李小康,袁润余,亓文宝,廖明
华南农业大学兽医学院,广东广州
摘要:本试验利用生物软件对亚型禽流感病毒////的血凝素进行抗原特性分析,结合关于禽流感病毒
血凝素抗原位点的文献报道,选定~ 位氨基酸和~位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域。利用本实验室
自主研发的原核表达载体载体,串联表达的两个区域,经和分析,证明重组产物得到
表达,抖柱纯化重组蛋白后,对周龄鸡进行免疫,经试验检测该重组蛋白可以刺激机体产生抗体。本研究为
亚型多肽疫苗的进一步研制奠定了基础。
关键词:禽流感病毒;亚型;;多肽疫苗
中图分类号:.. 文献标识码: 文章编号:——一

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禽流感是禽类急性、高度接触性传染病, 研制上取得了巨大的突破。基因工程疫苗具有其独
对养禽业的发展构成严重的威胁。其中亚特的优势,其中包括:便于制备多价疫苗、多联疫苗;
型禽流感还具有重要的公共卫生意义。目前对可以区别自然感染和疫苗免疫;容易做到安全生产,
禽流感的防控主要是依靠疫苗进行免疫保护。基因减少制苗环节的有害微生物泄漏的风险等,因此,基
工程技术发展到今天已经在基因工程亚单位疫苗的因工程疫苗具有良好的临床应用前景。本研究根据
禽流感病毒血凝素的抗原特性,串联表
收稿日期:——达两个抗原位点集中分布的区域,经验证表达产物
基金项目:国家计划项目,国家科技支撑具有免疫原性,为禽流感多肽疫苗的进一步研制奠
计划—,教育部创新团队项目,教育部
定了基础。
新世纪优秀人才支持计划—,广东省自然科学基金创
新团队项目,广东省科技计划项目资助材料与方法
作者简介:柯艳坤,女,硕士生,从事禽流感病毒研究,—
: . . 实验动物周龄鸡,购自北京梅里亚维
作者简介:齐岩一,男,博士生,从事禽流感病毒分子生物
通实验动物技术有限公司。
学研究,—: .
通讯作者:廖明,—:.. . 菌种及质粒感受态细胞为北京鼎国生
注:第作者与第作者对本文同等贡献物技术有限责任公司产品,感受态
中国兽医杂志年第卷第期
细胞为公司产品,自行设计的原核表达载. 重组蛋白对鸡的免疫试验周龄
体由华南农业大学禽病研究室提供。鸡,试验测定抗体为,随机分成组,每组
. 毒株亚型禽流感病毒// 只,第组为重组免疫组,第组为一哈
//株由华南农业大学禽尔滨维科生物技术开发公司产品阳性对照组,第
病研究室提供简称///株。组为空白对照组。重组免疫组的免疫程序为:
. 试验用引物见表。首次免疫,弗氏完全佐剂与纯化等体积混合,
表试验用引物按为./羽,颈部皮下注射,免疫后
进行第次免疫,用弗氏不完全佐剂同纯化等
名称酶切位点引物序列
体积混合,按为./羽,颈部皮下注射;
—
—阳性对照组./羽,颈部皮下注射;空白

对照组/羽,颈部皮下注射生理盐水。分别在
加丁免后第天,免后第天、第天采血,分离血
清,