文档介绍：厦门大学
硕士学位论文
H5亚型禽流感病毒广谱治疗性单抗13D4中试工艺的建立,及其
晶体培养与表位预测
姓名:魏旻希
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:夏宁邵
20080801
摘要~/誝的三维结构,并通过肿右来斡胍延芯高致病性禽流感珹是由土鞲胁《綡术鸬牧倚传染病。近年来,该疾病随着候鸟迁徙不断向各国传播,在造成巨大的经济损失的同时,也引起了多例人感染禽流感的病例,因此,对禽流感防治手段的研究引起了广泛重视。中和单抗是防治病毒性疾病的一种很有效手段。但是由于禽流感病毒基因突变频率高,尤其以血凝素基因为最,因此针对禽流感病毒的中和单抗中和谱较窄,往往只能中和少数遗传变异亚系的病毒,这就极大限制了这些中和单抗的应用。本实验室所制备的单抗具有广谱中和活性,能有效中和株不同遗传变异亚系的病毒代表株,在禽流感的防治中具有广阔的应用前景。本研究通过实验摸索,建立了一套低成本,简便高效的全抗体和的纯化制备方法,在中试规模生产中能够制备出符合国家检定标准的产品,纯度达到%左右,得率为%,为该抗体药物的成功奠定了基础。为了进一步揭示广谱中和活性的机制,本研究还进行了晶体的培养。通过对闻嘌跫纳秆『陀呕票赋隽四苡糜赬射线晶体衍射的单晶。另外,本研究还通过分子模拟的方法,得到了抗体我约结构的鯤切虷约澳D獾腍分子进行对接,预测单抗可能结合表位为:由,螅珹琇涣被岵谢槌傻墓瓜蟊砦弧;估梅肿佣越结果分析亚型禽流感的广谱中和表位和,综合单个肿佑个分子的对接结果用于寻找该单抗识别的抗原表位,用于寻找与抗原良好契合的多肽结构。:亚型流感病毒血凝素;单克隆抗体;抗原表位;结晶;分子模拟.,,,琒,”,,,.瓽..瓵甐
瓵甐,:,%.摘要琱琣甋甆瓸,,——甌%,.;籧.
趼源,氨基酸乖龆ù萘鞲萘鞲胁《,抗原决定簇亓春愣ㄇ崃春愣ㄇ:,道尔顿噶C庖呶讲舛:D,血凝抑制实验咧虏⌒郧萘鞲胁《浣用庖哂ü饧觳У蓝单克隆抗体嗫乖,分子量:窬彼崦,核定位信号:,核壳蛋白:墙峁沟鞍7哦谅肟蚣芗量杉盎砻婊篧,世界卫生组织亓纯杀淝崃纯杀淝《綬篗:缩略词:篈篊:篍:篽篒:簃篘篛篠:
的研究成果,获得碰上箜肟翁组鸦蚴笛槭业资助,在挎鹉勾畚眵硎笛槭彝瓿伞请在以上括号内填写课缎日夸另外,该学位论文为④留锉冷枷删韶删磷鸭镍题触劢叭脾厦门大学学位论文原创性声明釜本人呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体己经发表的研究成果,均在文中以适当方式明确标明,并符合法律规范和《厦门大学研究生学术活动规范孕》。题或课题组负责人或实验室名称,未有此项声明内容的,可以不作特人别声明。月年、
声明人┟.魏鬟年脯年日厦门大学学位论文著作权使用声明∥.不保密,适用上述授权。本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文,并向主管部门或其指定机构送交学位论文ㄖ街拾婧偷缱影,允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索,将学位论文的标题和摘要汇编出版,采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。.经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文,日解密,解密后适用上述授权。朐谝陨舷嘤ê拍诖颉啊獭被蛱钌舷嘤δ谌荨1C苎宦畚挠是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文,未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的,默认为公开学位论文,均适用上述授权。本学位论文属于:于年月
表型与多个基因相关,但在禽中主要是血凝素基因,因此蛋白成为防治禽治疗,以及蛋白的结构和功能研究,都有着重大意义。自年我国香港特别行政区发生高致病性禽流感爆发流行以来,我国大陆及越南、印度尼西亚等东南亚周边国家以及欧洲炼涞裙、中东拉克⒎侵埃及等国嗉瘫ǖ懒巳烁腥靖咧虏⌒郧萘鞲±緇W年至..,世界卫生组织报告人感染高致病性禽流感氛锊例达个国家∷缆矢叽¨。,但由于禽流感病毒可能通过候鸟迁徙造成全球播散,人类对禽流感病毒普遍缺乏免疫力,禽流感高病死率以及可能出现的病毒变异等原因,使禽流感作为可能引起国际大流行、严重威胁公共卫生安全的烈性传染病,受到世界范围的密切关注【】。在禽流感病毒的研究中发现,高致病性病毒流感病毒的主要靶蛋白。在治疗禽流感的药物中,治疗性抗体作为靶向型药物,具有特异性强,疗效好等优点。因此,以蛋白为靶向的治疗性抗体的生产和研究,对于禽流感的抗体作为一种蛋白质,其三维结构、运动及相互作用决定了它们的功能。对抗体结构的解析可以进一步研究其结合位点及作用方式,揭示与其结合的抗原表