文档介绍：雷公藤多苷调节肾组织p38MAPK信号通路改善糖尿病肾病肾小球炎症性损伤的作用和机制
[摘要] 目的:探讨雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii,GTW)在体内改善糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型鼠肾小球炎症性损伤的作用和机制。方法:采用单侧肾切除联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN模型。将大鼠随机分为3组:假手术组、对照组、GTW组,各5只。大鼠在造模成功后分别经灌胃给予蒸馏水(2 mL)或GTW悬浊液(50 mg?kg-1?d-1),每日1次,连续8周。各组大鼠自给药开始计时,第8周末处死。采集血液、尿液样本和肾组织,观察各组大鼠尿白蛋白、肾功能、肾小球形态特征、巨噬细胞(ED1+细胞)浸润以及肾组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-1β,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK),磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38,p-p38MAPK),转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的蛋白表达水平。结果:GTW能改善DN模型鼠一般情况、体重,减少尿白蛋白,减轻肾小球硬化,抑制肾小球
ED1+细胞浸润,下调肾组织TNF-α,IL-1β,p-p38MAPK,TGF-β1蛋白表达水平。结论:GTW在体内具有抑制炎症细胞浸润和炎症因子表达,减轻肾组织炎症性损伤的作用;GTW通过下调肾组织p38MAPK信号通路中关键信号分子――p-p38MAPK蛋白表达水平,抑制炎症信号通路活性,减少TGF-β1表达,从而,改善肾组织炎症性损伤。
[关键词] 糖尿病肾病;雷公藤多苷;炎症;p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路
目前,炎症(inflammation)作为糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)糖代谢紊乱、血流动力学障碍、氧化应激损伤等经典发病机制的下游途径被国内外学者高度关注[1]。DN炎症性损伤包括炎症细胞(inflammatory cell)活化、炎症因子(inflammatory cytokine)高表达、炎症信号通路(inflammatory signaling pathway)激活等重要环节。其中,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路不但可以调控炎症细胞增殖、分化和凋亡过程,而且,在炎症参与的肾组织病变(肾小球硬化和肾间质纤维化)中发挥着关键作用。研究表明,在DN相关病理因素诱导下,肾小球中浸润的巨噬细胞(
macrophage,MΦ)活化,过度生成炎症因子,如肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-1β、单核细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein,MCP)-1等,诱导磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38,p-p38MAPK)高表达,从而,激活p38MAPK信号通路,促进下游产物――转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1基因转录和蛋白表达,导致系膜细胞(mesangial cell,MC)增生及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积,最终,形成肾小球硬化[2]。因此,国内外学者认为,炎症是促进DN肾小球硬化的恶化因素;改善炎症,尤其是抑制p38MAPK信号通路的活性,就可以改善DN肾小球炎症性损伤[3-4]。
近年来,经典的抗炎症单味中药――雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii,GTW)在临床上被应用于治疗DN蛋白尿。据报道[5],GTW(120 mg?d-1)治疗65例DN患者3个月,蛋白尿减少,肾功能改善,其疗效优于缬沙坦;GTW治疗DN患者8周,其保护足细胞的作用与厄贝沙坦相当。此外,GTW可以减少DN模型鼠蛋白尿,改善肾小球硬化性损伤,其作用类似贝那普利[6]。然而,迄今为止,针对
DN模型相关的肾小球炎症性损伤,GTW在体内的作用和机制还不是很清楚。因此,笔者借助单侧肾切除联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的DN模型,阐明GTW在体内改善DN肾小球炎症性损伤的作用和机制。
1 材料
动物 15只8周龄左右的雄性Sprague Dawley大鼠(SPF)购自南京军区总院动物中心(批号slxk2012-