文档介绍：人碱性成纤维细胞生长因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)
含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平。用
纯化的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗
的微孔中依次加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),再与HRP 标记的碱性成纤维细胞生
长因子(bFGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB
显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深
浅和样品中的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定
吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(40ng/L) ×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 ×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
20 ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
10 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
5 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻